南方医科大学学报

作者：贾亚萌,佟晓哲,范敬炎

目的探讨巴西苏木素对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞增殖、凋亡和自噬的影响及其分子机制，为临床用药提供理论依据。方法用MTT法检测巴西苏木素对Tca8113细胞的增殖作用；Hoechst33342染色法观察细胞形态变化；Annexin V/PI双染色检测巴西苏木素对Tca8113细胞凋亡程度的影响；Western blot法检测凋亡相关蛋白bax、bcl-2、cleaved caspase3及自噬相关蛋白p-AMPK、p-mTOR、LC3B、p62 的表达；使用AMPK通路抑制剂与巴西苏木素共同作用于Tca8113 细胞，并检测通路相关蛋白p-AMPK、p-mTOR、LC3B的表达。结果MTT结果表明，巴西苏木素能明显抑制Tca8113 细胞的增殖，24 h 时IC50为31.17 μmol/L；Hoechst33342染色结果显示，巴西苏木素能使Tca8113细胞发生凋亡形态学改变，且与浓度正相关；Annexin V/PI染色结果显示，不同浓度巴西苏木素作用24 h后，细胞凋亡数和凋亡率均高于空白对照组；Western blot检测相关蛋白表达结果表明，巴西苏木素可抑制抗凋亡蛋白bcl-2，促进凋亡关键蛋白bax和cleaved-caspase3的表达，同时增加LC3B和p-AMPK的表达，降低p62和p-mTOR表达。在与抑制剂合用后，p-AMPK与LC3B表达量虽仍略高于空白对照组，但与单纯使用巴西苏木素相比均明显降低，而p-mTOR的表达较巴西苏木素组则明显升高（P<0.05）。结论巴西苏木素能抑制Tca8113细胞增殖并促进其凋亡，同时可通过AMPK/mTOR通路诱导细胞发生自噬。

来源：2019年第03期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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