南方医科大学学报杂志

南方医科大学学报杂志2019年第02期

• 二甲双胍治疗白塞病的临床疗效、安全性和调节Treg/Th17平衡的作用：30例前瞻性研究

  陈永,罗丹,林晨红,申艳,蔡剑飞,管剑龙

  目的观察二甲双胍治疗白塞病（Behcet病，BD）的临床疗效、安全性以及调节Treg/Th17平衡的作用。方法本研究对30例BD病患者进行前瞻性单盲和历史对照研究，记录二甲双胍治疗前后患者粘膜皮肤活动指数（MAIBD）、复发频率、C-反应蛋白（CRP）和红细胞沉降率（ESR）的变化；同时测定Foxp3、白介素-35（IL-35）、转化生长因子-β（TGF-β）、Ror-γt、IL-17和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的蛋白和mRNA的表达水平变化。结果共有26 例患者完成了研究，其中88.46%（23/26）的患者治疗效果满意，11.54%（4/26）的患者获得部分缓解。治疗中26.67%（8/30）的患者出现胃肠道副作用，并且由于副作用，第一周有4名患者退出研究。我们的研究结果表明二甲双胍治疗后患者的MAIBD和复发频率降低；此外，CRP和ESR的临床炎症指标均有所下降，差异有统计学意义。ELISA和qRT-PCR结果显示，治疗后患者Foxp3 和TGF-β蛋白和相对mRNA表达水平增加，而作为Th17标志物的ROR-γt，IL-17和TNF-α水平降低；另外，二甲双胍治疗后患者IL-35水平也有所降低。结论二甲双胍有助于缓解BD患者的症状，可降低炎症反应指标，调节Treg/Th17轴，可作为治疗BD的潜在候选药物。中国临床试验注册：ChiCTR-ONC-16009621。注册时间：2016-10-26

• 雌二醇与ESR1靶向结合通过ERK信号通路调控软骨细胞的增殖

  刘敏,谢巍伟,郑维,尹丹旸,罗瑞,郭风劲

  目的探讨雌二醇（E2）/ESR1（ERα）对C28I2软骨细胞增殖的影响及可能的分子机制。方法应用Ad-Easy 腺病毒包装系统构建和包装过表达腺病毒Ad-ESR1，Western blot及QPCR检测该基因在细胞中蛋白及RNA表达情况。在E2处理下，设立不同病毒感染组处理C28I2细胞，Western blot 检测各处理组C28I2细胞的自噬、凋亡相关蛋白的表达及ERK信号通路的磷酸化水平；免疫荧光实验观察细胞内自噬流的强弱；FCM检测各组细胞凋亡率及周期；QPCR检测mRNA水平增殖相关标志基因（PCNA）、细胞周期蛋白B1（CyclinB1）和细胞周期蛋白D1（CyclinD1）表达。ERK特异性抑制剂处理细胞，Western blot检测抑制ERK通路后自噬及凋亡相关蛋白表达，QPCR检测增殖相关标志基因表达。结果成功构建过表达腺病毒Ad-ESR1。过表达ESR1 能够促进E2 处理后LC3 和ATG7 的表达，促进LC3 和LAMP1 在细胞质中共定位，抑制cleaved caspase3、cleavedcaspase12的表达并且促进PCNA、cyclinB1和cyclinD1表达，且细胞内pERK明显减少；而干扰ESR1表达后，自噬相关蛋白表达减少，自噬流减弱，凋亡蛋白表达增加，增殖标志基因表达下调，细胞内pERK相对增加。特异性抑制剂阻断ERK活化，E2/ESR1诱导的自噬增加以及凋亡减少被抑制，增殖相关基因表达被抑制。结论E2与ESR1的靶向结合可促进软骨细胞的增殖，其作用机制可能与抑制ERK信号通路活化从而促进自噬、抑制凋亡有关。

• miR-593 通过调控PLK1基因的表达抑制结肠癌细胞的增殖

  马金珠,朱益平,王箴,昝嘉伟,曹陇,冯遵永,王森林,范倩,颜亮

  目的探讨miR-593在结肠癌细胞增殖中的作用及分子机制。方法利用生物信息学分析筛选miR-593可能结合的靶基因为PLK1；利用双荧光素酶报告基因实验验证miR-593 和PLK1 基因的结合；通过qRT-PCR、Western blotting 验证PLK1 为miR-593直接作用的靶基因；通过CCK-8实验证明miR-593通过调控PLK1基因的表达抑制结肠癌细胞的增殖。结果运用三种生物信息学软件对PLK1可能结合的miRNA进行了预测与分析，发现miR-593可能结合PLK1基因；双荧光素酶报告基因实验证明miR-593 与PLK1 基因发生了结合；Western blotting 结果表明，PLK1 在miR-593 mimic 转染组表达量显著下降，而在miR-593 inhibitor 组明显升高，相对于对照组均具有统计学差异（P<0.05）；qRT-PCR结果表明，PLK1 RNA水平在各组中表达水平差异无统计学意义（P>0.05）；细胞增殖实验表明，miR-593与PLK1对结肠癌细胞增殖的影响为相反关系，且共转染miR-593mimic与PLK1过表达质粒组对细胞增殖的影响介于单独转染miR-593 mimic组与PLK1过表达质粒组之间。结论miR-593通过调控PLK1基因的表达抑制了结肠癌细胞的增殖，并发挥抑癌miRNA的作用。

• 慢性乙型肝炎患者的基线丙氨酸氨基转移酶水平与抗病毒疗效的关系

  肖芷琪,周福元,周彬,杨洁

  目的分析恩替卡韦与α干扰素在不同基线丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平治疗48周后的疗效，为临床慢性乙型肝炎（CHB）抗病毒治疗提供参考依据。方法回顾性分析369例CHB患者的资料，根据治疗方案及基线ALT水平分组，分析治疗48周后不同治疗方案、不同基线ALT水平的病毒学应答率、HBeAg转阴率、HBsAg下降情况，评估治疗效果。结果①病毒学应答情况：治疗48周后恩替卡韦组在基线ALT≤5倍正常值上限（ULN）（组1）、5~10×ULN（组2）、>10×ULN（组3）的病毒学应答率分别为83.3%、91.4%、95.5%，α干扰素组则分别为19.7%，40%，42.9%，不同治疗方案之间及不同ALT水平组之间对比差异均有统计学意义（P<0.05）。②HBeAg转阴情况：恩替卡韦组的组1、组2、组3在治疗48周后的HBeAg转阴率分别为8.3%、16.7%、35.5%，而α干扰素组分别为1.8%、41.9%、38.1%，对比同一治疗方案不同ALT分组，差异具有统计学意义（P<0.05），而分析同一ALT分组不同治疗方案，仅在组2中两种治疗方案的HBeAg转阴率差异有统计学意义（P<0.05）。③HBsAg下降情况：恩替卡韦组在基线ALT≤5×ULN组和>5×ULN组的HBsAg小于200 U/mL率分别为2.5%、13.8%，两者差异无统计学意义，α干扰素组则分别为30.6%、33.3%，差异无统计学意义（P>0.05），而同一ALT分组两种治疗方案的HBsAg小于200 U/mL率的差异均具有统计学意义（P<0.05）。结论治疗48周后，恩替卡韦组在各个ALT组均较α干扰素组有更高的病毒学应答率。在基线ALT5~10×ULN组中，α干扰素组的HBeAg转阴率高于恩替卡韦组。对于HBsAg下降情况，α干扰素组在各个ALT组均较恩替卡韦组有更好的效果，而同一治疗方案不同ALT组中，基线高ALT水平（ALT>5×ULN）组的疗效均优于基线低ALT水平（ALT≤5×ULN）组。因此，建议基线ALT水平在5~10×ULN的患者优先选择α干扰素治疗，而基线ALT水平≤5×ULN、>10×ULN的患者选用恩替卡韦治疗。

• 替米沙坦抑制单侧输尿管梗阻小鼠肾脏Mtdh表达而减轻肾脏纤维化

  彭芬芬,李红瑜,尹柏辉,王育娴,陈毅华,许兆忠,罗丛伟,龙海波

  目的研究原癌基因metadhein（Mtdh）在单侧输尿管梗阻肾脏的表达及替米沙坦对其表达和肾脏纤维化的影响。方法采用单侧输尿管结扎梗阻建立肾间质纤维化小鼠模型和小管上皮细胞间质转分化模型。18只雄性C57小鼠随机分为假手术组，单侧输尿管结扎梗阻、单侧输尿管结扎并替米沙坦干预组。MASSON染色观察肾脏病理改变；免疫组织化学和Western blot检测各组细胞外基质蛋白纤连蛋白（FN1）、α平滑肌蛋白（α-SMA）、胶原蛋白Ⅰ（ColⅠ）、钙连蛋白和Mtdh的表达情况；体外细胞实验采用TGF-β1预刺激小鼠肾小管上皮细胞，并同时利用siRNA干涉下调Mtdh，Western blot检测上述蛋白表达变化。结果模型组肾脏纤维化显著高于假手术组，FN1、α-SMA、Col Ⅰ和Mtdh表达显著升高（P<0.05），钙连蛋白表达显著下降（P<0.05）；替米沙坦干预后，肾脏纤维化病理减轻，FN1、α-SMA、Col Ⅰ及Mtdh表达显著下降（P<0.05），钙连蛋白表达回升（P<0.05）。采用si-Mtdh下调肾小管上皮细胞Mtdh后，FN1、α-SMA、Col Ⅰ表达均显著下降（P<0.05），钙连蛋白表达回升（P<0.01）。结论替米沙坦可抑制细胞基质蛋白生成，抑制Mtdh的表达，减轻小鼠肾脏纤维化。

• 自噬相关基因3过表达促进乳腺癌细胞自噬并抑制盐霉素诱导的细胞凋亡

  李芳,黄果,彭平,刘瑶,李双辉,刘罗根,章运生

  目的研究人自噬相关基因3（ATG3）过表达对乳腺癌细胞自噬及盐霉素诱导细胞凋亡的影响和机制。方法采用慢病毒的方法，构建了稳定过表达ATG3的乳腺癌MCF-7细胞株；通过Western blotting、免疫荧光和透射电镜等方法分析了ATG3过表达对乳腺癌MCF-7细胞自噬的影响；并用AKT/mTOR的激动剂（SC79和MHY1485）分析AKT/mTOR信号通路对ATG3过表达促进细胞自噬的影响；通过Western blotting和流式细胞术，同时结合盐霉素和自噬抑制剂（3-MA），分析了自噬对ATG3过表达抑制盐霉素诱导细胞凋亡的影响。结果成功构建稳定高表达ATG3的MCF-7细胞株。ATG3能够促进MCF-7细胞自噬，并且抑制AKT/mTOR信号通路。ATG3 明显抑制了盐霉素诱导的细胞凋亡（P<0.01），且ATG3 过表达组中促凋亡分子cleavedcaspase3（P<0.01）和Bax表达明显减少（P<0.05），抗凋亡蛋白Bcl-2表达增多（P<0.05）。自噬的阻滞能够削弱ATG3对盐霉素诱导细胞凋亡的抑制作用。结论ATG3可能通过抑制AKT/mTOR信号通路诱导乳腺癌MCF-7细胞自噬，并通过细胞自噬减少盐霉素诱导的细胞凋亡。综上提示诱发细胞自噬可能是乳腺癌细胞耐药的机制之一。

• 南葶苈子乙酸乙酯浸膏对人非小细胞肺癌H1975细胞增殖、凋亡的影响

  桂家辉,朱美林,白祥建,李博涵,高美佳,马慧,李红梅,吴成柱

  目的探讨南葶苈子的乙酸乙酯浸膏对人非小细胞肺癌H1975细胞增殖、凋亡的影响。方法采用系统溶剂萃取法对南葶苈子甲醇浸膏进行初步分离。MTT法检测各萃取浸膏（5、10、20、40、80 μg/mL）的细胞毒性。集落克隆法检测不同浓度的南葶苈子乙酸乙酯浸膏（0.625、1.25、2.5 μg/mL）对人非小细胞肺癌H1975细胞增殖的影响。Annexin V-FITC/PI双染及流式细胞术检测不同浓度的乙酸乙酯浸膏（0、10、20、40 μg/mL）对人非小细胞肺癌H1975细胞凋亡的影响。免疫印迹法检测不同浓度乙酸乙酯浸膏（0、10、20、40 μg/mL）对凋亡相关蛋白Akt、Bax及Bcl-2蛋白表达的影响。建立人非小细胞肺癌H1975细胞裸鼠移植瘤模型，设置空白组，给药组（100 mg/kg），阳性对照组，观察乙酸乙酯浸膏的体内抗肿瘤活性。结果MTT和集落克隆结果显示，乙酸乙酯浸膏呈剂量依赖、时间依赖方式抑制人非小细胞肺癌H1975细胞增殖。与对照组相比，差异均具有统计学意义（P<0.05）。流式细胞术结果表明，乙酸乙酯浸膏能显著诱导人非小细胞肺癌H1975 细胞发生凋亡（P<0.05），并且呈现浓度依赖性。Western blot结果显示，乙酸乙酯浸膏可降低蛋白Bcl-2、Akt的表达，增加蛋白Bax的表达（P<0.05）。另外，南葶苈子乙酸乙酯浸膏表现出较好的体内抗肿瘤活性，对裸鼠体质量和器官的毒性较小。结论南葶苈子的乙酸乙酯浸膏具有较强的体内、体外抗肿瘤作用，具有成为抗肺癌药物的潜力。

• 胸腔积液与血清中的癌胚抗原及其比值对结核性与肺癌性胸腔积液的诊断价值

  李锐成,郜赵伟,董轲,王会平,张惠中

  目的探讨联合检测胸腔积液癌胚抗原（PCEA）和血清癌胚抗原（SCEA）以及二者比值（PCEA/SCEA，P/S）在鉴别结核性与肺癌性胸腔积液中的临床诊断价值。方法选取并收集我院2016年4月~2018年3月收治的临床确诊的82例结核性胸腔积液液患者（对照组）和120例肺癌性胸腔积患者（试验组）的胸腔积液和血清进行CEA水平检测，计算出P/S值，再将试验组按照不同病理类型分成鳞癌、腺癌和小细胞癌3个亚组进行组间和组内比较，以测得各组间检测指标的水平差异。创建受试者工作特征曲线（ROC曲线）进行分析以确定诊断肺癌性胸腔积液的最佳临界值，以其为诊断标准，计算出单项检测以及联合检测的诊断性能。结果肺癌组和3 个亚组的PCEA、SCEA以及P/S 水平均高于结核组（P<0.05）；3 项指标的ROC曲线下面积分别为0.925、0.866 和0.796，以PCEA为最高，其灵敏度、特异度、准确率、最佳临界值分别为：83.33%、96.34%、88.61%、3.26 ng/mL；SCEA诊断性能最低，但具有取材简便、无创伤的优点；P/S诊断性能高于SCEA、低于PCEA，但与SCEA联合诊断后可大大提高诊断性能，减少误诊和漏诊；并联试验中的三者联合检测的敏感度均高于单项和两两联合检测（P<0.05），特异度无统计学差异;三者联合诊断肺癌性胸腔积液的曲线下面积为0.941，均高于单项和两两联合检测。结论在肯定PCEA诊断优势的同时，也要考虑到SCEA和P/S的不可或缺性。PCEA、SCEA和P/S三者联合检测对肺癌性胸腔积液的诊断有较高的敏感性,对疑似病例的快速、准确的鉴别诊断具有重要的辅助价值。

• 冷刺激敏感哮喘患者的临床及炎症表型特点

  郭维丽,李敏超

  目的探讨对冷刺激敏感的哮喘患者的临床症状、肺功能及气道炎症表型特点。方法选取于我院呼吸内科就诊的初诊支气管哮喘或诊断为支气管哮喘但未正规治疗的急性发作（轻度至中度）患者80例，根据冷空气刺激能否诱发咳嗽、喘息等呼吸道症状将其分为冷刺激不敏感组（45例）和冷刺激敏感组（35例），均予以糖皮质激素（ICS）+长效β2受体激动剂（LABA）（沙美特罗替卡松粉吸入剂50 μg/250 μg，2 次/d）及孟鲁斯特钠（10 mg 口服，1 次/d）治疗3 月，必要时加用短效β2 受体激动剂（SABA）或（和）全身用糖皮质激素（泼尼松10 mg 1次/d或甲强龙40 mg静脉推注），分别于治疗前及治疗3月后行哮喘控制问卷（ACT）了解咳嗽、喘息等临床症状控制情况，肺功能检查明确治疗前肺功能减损及治疗后肺功能恢复情况，血及诱导痰细胞计数以明确气道炎症特点，并进行统计学分析。结果两组患者治疗前年龄、性别、体质量指数、吸烟者所占比例、过敏性鼻炎情况无统计学差异。冷刺激敏感组在就诊前1年内急性发作次数较冷刺激不敏感组多（P<0.05），但治疗期间（3月）为控制症状冷刺激敏感组使用SABA及激素较冷刺激不敏感组并无显著性差异（P>0.05）。冷刺激敏感组ACT评分在治疗前后均低于冷刺激不敏感组（P<0.01），且其治疗前FEV1/FVC%、FEV1%pred减损较不敏感组明显（P<0.01），治疗后FEV1/FVC%、FEV1%pred恢复程度较不敏感组差（P<0.05）。冷刺激敏感组在治疗前后血及诱导痰嗜酸性粒细胞百分比与不敏感组无显著差异；但中性粒细胞百分比明显高于不敏感组（P<0.01）。根据治疗前诱导痰细胞分类结果，冷刺激不敏感组以嗜酸性粒细胞型为主，所占比例为60%，中性粒细胞型为20%，而冷刺激敏感组以中性粒细胞型为主，其所占比例为42.86%，显著高于冷刺激不敏感组（P=0.03），嗜酸性粒细胞型仅为31.43%，显著低于冷刺激不敏感组（P=0.01）。结论冷刺激敏感哮喘患者症状常反复发作和（或）加重，其肺功能受损明显，气道内炎症表型也不同于经典哮喘，以中性粒细胞型为主。

• 转录因子SOX12在肺腺癌中的表达及其与临床预后的关系

  李利,张婷婷,陈玉华,宋佳,孟瑶,刘姝,谢剑明

  目的探讨转录因子SOX12在肺腺癌中的表达及其与临床预后的关系。方法采用大型癌症基因组数据库分析SOX12在肺腺癌中的表达水平，然后分别采用免疫组织化学（IHC）和半定量PCR方法检测36例肺腺癌癌组织、15例距肿瘤边缘5 cm以上癌旁正常组织和21例正常肺组织中SOX12 的表达情况，同时通过Kaplan-Meier Plotter 数据库获取了866例肺腺癌患者和675例肺鳞癌患者的生存数据，分析SOX12基因表达水平对患者总生存期（OS）和进展后生存期（PPS）的影响。结果TCGA数据库和GEO（GSE40419）样本集提示SOX12的表达水平在肺腺癌组中显著高于癌旁组（P<0.001），同时IHC和半定量PCR结果均显示SOX12 在肺腺癌组织中的表达高于癌旁正常组织和正常肺组织，差异具有统计学意义（P<0.001）；分析Kaplan-MeierPlotter数据库显示SOX12基因表达水平高的肺腺癌患者较表达水平低的患者OS和PPS短，差异具有统计学意义（P<0.05）；而SOX12基因表达水平对肺鳞癌患者的OS和PPS均无明显影响。结论转录因子SOX12在肺腺癌组织中呈明显高表达水平，且其表达水平与患者的生存和预后关系密切，SOX12可能成为预测肺腺癌发生发展的辅助指标。

• 数字乳腺层析成像系统影像链的设计与优化

  李明强,马昆,陶熙,王永波,何基,韦子权,谌高峰,李穗,曾栋,边兆英,吴国辉,廖山,马建华

  目的针对数字乳腺层析成像技术（DBT）需求，研制DBT整机系统，实现其成像影像链的设计与优化。方法基于三维X射线断层成像技术以及数字影像处理技术，作者结合DBT成像扫描模式，研究其投影数据校正、几何校正、投影增强、滤波调制及图像重建方法，并搭建了硬件测试系统。实验中，利用标准ACR体模与高分辨率体模，对系统稳定性及噪声水平进行评估；并采用商用设备的病人投影数据测试影像链成像算法效果。结果采用几何校正参数重建高分辨率体模的图像，线对清晰，无混淆伪影；滤波调制后重建的ACR体模图像中，钙化点、囊肿、纤维结构更加清楚；增强处理后重建的病人乳腺图像，组织间对比度更高，病灶显示更加清晰。结论本文所介绍的DBT系统可用于乳腺断层成像，图像质量与商用DBT系统相当，为乳腺疾病的诊断提供重要的影像信息。

• 运动配准先验图像的4D-CBCT优质重建

  陈美玲,黄毅,陈武凡,陈歆,张华

  四维锥束CT（4D-CBCT）成像可以为图像引导放射治疗提供精确的实时呼吸运动定位信息，如何提高4D-CBCT重建图像的精确度是目前研究的热点，压缩感知方法（PICCS）算法在基于压缩感知（CS）理论的所有4D-CBCT重建算法中表现上佳，本文提出的改进先验图像的PICCS算法在传统PICCS算法基础上针对先验图像进行改进，按照每一个相位的位置信息构建其对应的先验图像，消除了投影数据不匹配所导致的重建图像运动模糊的现象，实验结果展示了文章方法相比传统的PICCS重建结果组织边界更加清晰，运动伪影减少，图像分辨率提高。

• 手掌静脉识别：基于端到端卷积神经网络方法

  杜东阳,路利军,符瑞阳,袁丽莎,陈武凡,刘娅琴

  目的提出一种基于端到端卷积神经网络的手掌静脉识别方法。方法在构建的手掌静脉识别网络模型中，卷积层和池化层交替级联提取图像特征，同时通过神经网络分类器进行分类识别，采用包含动量项的随机梯度下降法最小化识别误差，在误差减小的方向上不断优化模型。采用训练集数据扩展、批归一化、Dropout、L2参数正则化四种方法提升网络的泛化能力。结果对公共的PolyU库(图像在高约束条件下获取)和自建库（图像在自然条件下获取）中全部500个对象的识别，正确识别率分别达到99.90%和98.05%，单个样本的识别时间均小于9 ms。结论与传统算法相比，本文方法能够有效提升掌静脉识别在实际应用中的准确率，为掌静脉识别提供一种新思路。

• 胃癌中EXD3基因的表达及功能的生物信息学分析

  孙灯众,刘牧林,吴华彰,黄福新

  目的通过生物信息学分析研究胃癌与正常胃粘膜间具有差异性表达的基因，找出参与胃癌发生发展及预后的关键基因，并对其所涉及的功能进行分析预测。方法从GEO表达谱数据库中下载表达谱基因芯片数据GSE100935（包括18例胃癌样本及正常胃粘膜组织），利用Morpheus在线软件分析基因芯片GSE100935的数据，获得在胃癌与正常胃粘膜组织中存在差异表达的基因，并构建聚类分析热图；利用软件UALCAN在线分析差异表达基因在胃癌与正常胃粘膜组织中表达水平；利用Kaplan-Meier绘图软件对差异表达基因在胃癌患者中的表达高低进行生存分析；最后采用Fun Rich软件进行GO功能富集分析，网站STRING构建目的基因蛋白互作网络。结果通过分析基因芯片GSE100935 获得45119 个差异表达的基因；在线分析软件UALCAN显示EXD3基因在胃癌组织中高表达；同时生存分析提示当EXD3基因高表达时，胃癌患者的预后相对较差；GO功能富集分析发现，差异表达基因主要与胃癌细胞核苷酸的新陈代谢调节以及转录因子的活动有关。结论EXD3可能是胃癌中潜在的癌基因，可能与DNA损伤修复有关，其表达上调在胃癌的发生发展及预后过程发挥重要作用，并有望成为判断胃癌患者预后的重要的生物学指标。

• 产前应激子代大鼠海马Wnt/β-catenin信号通路的改变诱导抑郁和焦虑样行为

  张玉荣,王瑞忠,陈蕊,王莉

  目的探索海马Wnt/β-catenin信号通路的改变在产前应激（PS）子代大鼠抑郁和焦虑样行为中的作用。方法通过大鼠产前束缚应激建立抑郁模型，将体质量240~260 g的Sprague-Dawley雌鼠随机分成2组，对照组于孕期不做任何处理，产前束缚应激组于孕14~20 d给予束缚应激，3次/d，45 min/次。1月龄子代大鼠随机分为2组：对照组和产前应激组进行实验研究。采用旷场实验（OFT）和强迫游泳实验（FST）评价各组大鼠的抑郁和焦虑样行为，通过Western blot 测定各组大鼠海马区Wnt1、Gsk-3β，β-catenin蛋白的表达。结果与对照组相比，产前应激组子代大鼠在旷场实验中的穿越中央格次数明显减少（P<0.01），中央格停留时间显著减少（P<0.05），在强迫游泳实验中不动时间明显延长（P<0.01），表现出明显的焦虑和抑郁样行为。PS使大鼠子代海马Gsk-3β表达显著增加（P<0.01），使β-catenin和Wnt1表达明显降低（P<0.01）。结论产前应激导致Wnt/β-catenin信号系统功能改变，可能引起子代大鼠抑郁和焦虑样行为的产生。

• 肾病Ⅲ号方治疗慢性肾脏病蛋白尿的机制：基于网络药理学方法

  刘华熙,吕智豪,田春阳,欧阳文坤,熊一凡,游艳婷,陈立倩,邓伊健,赵晓山,孙晓敏

  目的基于网络药理学探讨肾病Ⅲ号方的主要活性成分、靶点及治疗慢性肾脏病蛋白尿的作用机制。方法结合口服生物利用度和类药性，在TCMSP数据库中寻找与肾病Ⅲ号方组方中药相关的活性成分、靶点，在GeneCards数据库搜索蛋白尿相关靶点，采用Cytoscape软件构建活性成分-靶点网络，并将获取的靶点信息利用ClueGO进行基因通路的富集分析。结果从肾病Ⅲ号方中筛选获得102个活性成分、作用于126个靶点，与蛋白尿相关的靶点69个，流体剪切应力和动脉粥样硬化相关通路显著性高。结论初步验证了肾病Ⅲ号方的组方合理性及其治疗慢性肾脏病蛋白尿的科学性，并为进一步深入探讨肾病Ⅲ号方治疗慢性肾脏病蛋白尿的机制奠定理论基础。

• 脂蛋白(a)与冠心病患者临床稳定性及冠状动脉狭窄程度的关系

  马煜盛,饶甲环,龙洁旎,林立龙,刘季晨,郭志刚

  目的探究血清脂蛋白（a）[Lp（a）]与冠状动脉粥样硬化性心脏病（CAD）及其冠状动脉狭窄程度的关系。方法回顾性收集2013年1月~2016年12月在南方医院行冠脉造影的患者531例，按照Lp（a）浓度是否大于30 mg/dL分为高Lp（a）组（HLPA, n=191）和低Lp（a）组（LLPA, n=340），根据冠脉造影结果判断是否罹患CAD；CAD患者根据临床稳定性分为稳定性心绞痛组（SAP组）和急性冠脉综合征组（ACS组），比较两者及其冠脉狭窄程度与Lp（a）的关系。结果高Lp（a）组和低Lp（a）组间在年龄、性别、体质量指数（BMI）、吸烟、高血压和糖尿病史无统计学差异（P>0.05），两组间有可比性。多因素Logisitic回归分析显示年龄、性别、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）和Lp（a）是入组人群患CAD的独立危险因素。Lp（a）升高，罹患CAD风险增高（OR=2.443，95%CI：1.205~4.951，P=0.013）。且无论LDL-C 水平高低，高Lp（a）组较低Lp（a）组患CAD 的风险均更高（P=0.006 和P=0.020）。在冠心病患者中，ACS组较SAP组Lp（a）水平更高（P<0.001）；高Lp（a）和低Lp（a）两组间高Gensini评分的患者分别占17.3%和5.6%（P=0.026），其Gensini评分与Lp（a）呈线性关系（R=0.130, P=0.006）。结论Lp（a）是CAD的独立危险因素，高Lp（a）是CAD的残余风险；Lp（a）升高与冠心病临床稳定性及冠状动脉狭窄程度相关。

• 加味四君子汤对H22肝癌小鼠的抑瘤作用和免疫功能的影响

  陈莉媚,金彤,宁春桃,王素丽,王立杰,林敬明

  目的探讨加味四君子汤的体内抑瘤活性及对肝肾毒性、免疫系统的影响。方法建立H22荷瘤小鼠模型，将荷瘤小鼠分为空白组、模型组、环磷酰胺组、加味四君子汤低、中、高剂量组。通过计算抑瘤率，观察肿瘤组织HE染色病理切片，免疫组化法检测Bax、Bcl-2、Bax/Bcl-2及caspase-3水平研究加味四君子汤的抑瘤活性及相关机制；通过肝肾生化指标观察加味四君子汤的肝肾毒性；通过计算荷瘤小鼠免疫器官指数、外周血检测血常规和酶联免疫法检测小鼠血清的IL-2、TNF-α的水平探讨加味四君子汤对H22荷瘤小鼠免疫功能的影响。结果环磷酰胺组、加味四君子汤中剂量、高剂量组的肿瘤质量均低于模型组（P<0.05），抑瘤活性差异均有统计学意义；其肿瘤细胞有不同程度的破裂坏死，免疫组化各实验组能有效上调Bax和caspase-3蛋白表达，下调Bcl-2蛋白表达，提高Bax/Bcl-2比值。同时，加味四君子汤降低了荷瘤小鼠的Cr、BUN、AST与ALT水平，提高了免疫器官指数和外周血白细胞、红细胞和血红蛋白含量，上调了TNF-α、IL-2 水平，其中，高剂量组与模型组差异具有统计学意义（P<0.01）。结论加味四君子汤具有较好的体内抑瘤活性，能改善荷瘤小鼠的肝肾功能，其抑瘤作用可能与上调Bax、caspase-3表达、TNF-α和IL-2水平，下调Bcl-2蛋白表达以及增强小鼠的非特异性免疫功能有关。

• Wang手术用于低龄漏斗胸治疗

  王文林,龙伟光,陈春梅

  目的对低龄漏斗胸患儿使用Wang手术的经验进行总结。方法对21例低龄漏斗胸患儿使用Wang手术的临床资料做分析。于剑突前方做正中纵行切口，切口长1~2 cm，于肌肉深层向两侧胸壁做钢板隧道，于胸骨后对膈肌与胸骨之间的纤维组织做游离。以钢丝从剑突下方经凹陷胸壁的深面做贯穿缝合，将一条特制钢板放入骨性结构表面的隧道中，提拉钢丝，并将其固定于钢板中部，缝合切口，完成手术。结果本组均以3条钢丝做缝合固定，术中放置1条钢板，手术时间25~51（38.1±9.6）min；术中出血5~10（7.1±1.5）mL；住院天数为6~10（8.1±1.3）d。术后切口愈合良好，无严重疼痛，无明显并发症。术后对所有患儿均做随访，随访时间1~13月。随访期间未见凹陷复发，未见钢板移位、转位等并发症。依据漏斗胸术后评价标准做效果评价，总分9分者13例，总分8分者8例，效果均非常满意，无基本满意和不满意病例。结论对于低龄漏斗胸患儿，Wang手术是一个较为理想的选择。

• B细胞连接蛋白的结构、功能及其在B细胞相关疾病发展中的作用

  肖斌,李嘉颖,周梦思,李晓晴,黄晓燕,杭建峰,孙朝晖,李林海

  B细胞连接蛋白，是B细胞受体通路的关键接头蛋白。B细胞连接蛋白通过自身的结构特性及蛋白互作网络参与调控PLC-γ的活性和Ras通路激活，在B细胞受体信号转导中发挥重要作用，广泛参与调控B细胞的增殖、分化、凋亡及信号传导等过程，并与过敏性疾病、多发性硬化症、染色体组非整倍体、无丙种球蛋白血症、B淋巴细胞白血病、淋巴瘤的发生发展密切相关。本文对B细胞连接蛋白的结构、生物学功能及其在B细胞相关疾病中的作用进行综述：B细胞连接蛋白可与多个效应蛋白协作，激活B细胞受体信号通路，从而影响着B细胞的发育成熟及功能调节；B细胞连接蛋白发生功能性突变，会破坏B细胞稳态并影响B细胞发育成熟，从而导致B细胞相关疾病的发生。全面总结B细胞连接蛋白的生物学功能不仅有助于了解B细胞相关疾病的发生机制，也有望将B细胞连接蛋白作为相关疾病的治疗靶标提供新思路和突破口。