南方医科大学学报杂志

南方医科大学学报杂志2023年第11期

• 药物过度使用性头痛患者脑内铁沉积分布的定量磁敏感成像研究

  李 鑫, 赵 赫, 刘梦琦, 陈志晔

  目的 运用定量磁敏感成像（QSM）技术研究药物过度使用性头痛（MOH）患者脑内铁沉积分布特点，并探索其神经机制。方法 37名MOH患者和 21名健康志愿者进行相同的大脑多回波梯度回波序列及高分辨率结构成像采集。采用基于体素的方法分析脑内铁沉积变化，提取出阳性脑区定量磁敏感值，最后将磁敏感值与临床变量进行相关性分析。结果 与健康志愿者相比，MOH 患者脑内铁沉积增加的脑区主要为双侧黑质（MNI 坐标：8，-18，-14；-6，-16，-14，P0.05）。左侧黑质曲线下面积为0.734，截断值为0.077，灵敏度为72.97%，特异性为70.37%；右侧黑质曲线下面积为0.699，截断值为0.084，敏感性为72.97%，特异性为62.96%。结论 MOH患者脑内双侧黑质内铁沉积水平增加，这可能为MOH中脑边缘多巴胺系统的功能障碍机制提供新的研究思路，但MOH的病理生理机制还需要进一步研究证实；同时，QSM技术可作为检测MOH中脑铁沉积变化的无创性且有效的定量工具。

• 益肺散结丸缓解小鼠癌因性骨骼肌萎缩的作用

  吴迎朝, 左 谦, 罗 薇, 王 慧, 皮大锦, 陈前军, 陈利国, 林丽珠, 欧阳明子

  目的 研究益肺散结丸对荷瘤小鼠骨骼肌重量、强度、病理形态、糖原和脂质含量以及代谢强度的影响，以探究益肺散结丸治疗荷瘤小鼠骨骼肌萎缩的作用机制。方法 将16只雌性ICR小鼠通过腹腔注射小鼠Lewis肺腺癌细胞建立荷瘤小鼠动物模型，随机分为模型组、益肺散结丸治疗组（4 g·kg-1·d-1，共21 d），8只/组，并设正常组（n=8）。记录小鼠体质量、腓肠肌重量，前肢握力试验测试肌肉强度，液质联用分析益肺散结丸入血成分，酶联免疫吸附测定血清血糖、血清胰岛素浓度和血清及腓肠肌炎症因子水平。苏木素-伊红染色和透射电子显微镜观察腓肠肌病理形态，转录组学测序分析腓肠肌病理过程中涉及的信号通路变化，过碘酸雪夫染色观察腓肠肌糖原含量，油红O染色观察腓肠肌脂质含量，腺苷三磷酸酶染色观察腓肠肌代谢强度，免疫组织化学染色观察腓肠肌炎症细胞浸润程度和P-AKT水平，试剂盒检测腓肠肌肌酸激酶、乳酸脱氢酶和肌红蛋白含量。结果 益肺散结丸增加荷瘤小鼠的骨骼肌强度及腓肠肌重量（P<0.001），降低腓肠肌损伤标志物（P<0.01）。转录组学测序及入血成分显示，益肺散结丸改善荷瘤小鼠腓肠肌损伤的机制可能与炎症浸润、胰岛素抵抗和脂质代谢相关（P<0.05）。实验结果显示，益肺散结丸降低血清和腓肠肌炎症因子水平（P<0.05）及腓肠肌的促炎细胞浸润，增加腓肠肌胰岛素敏感性指标P-AKT水平，提高糖原和脂质含量以及代谢水平。结论 益肺散结丸可能通过降低炎症性胰岛素抵抗缓解癌因性骨骼肌萎缩。

• 环状RNA hsa_circ_0006834可作为肝细胞癌患者预后的潜在生物标志物

  张 铃, 赵春雨, 许瑶瑶, 陈炎森, 蔡志雄, 林浩伟, 蔡巧燕

  目的 基于RNA测序技术筛选肝细胞癌（HCC）中差异表达的环状RNAs（circRNAs），检测其在HCC组织中的表达变化，并探讨其与临床特征及预后的关系，为HCC提供潜在的分子标志物和治疗靶点。方法 选取56对HCC组织及其癌旁组织进行RNA测序，筛选出具有差异表达的 circRNAs；采用RT-qPCR法在另外选取的15对HCC组织和配对的癌旁组织中对circRNA进行差异表达的验证；分别运用卡方、Cox比例风险模型及Kaplan-Meier法分析circRNA与HCC患者临床特征及预后的相关性；采用ROC曲线评估circRNA对HCC患者无复发生存期和总体生存期的预测价值。结果 基于56对HCC组织及其癌旁组织的RNA测序数据分析显示：在HCC组织中显著上调的circRNAs有17个，显著下调的circRNAs有 45个（P<0.05）；其中circRNA hsa_circ_0006834在HCC中异常低表达，并在另外15对HCC组织及其癌旁组织中进一步验证其在癌组织中显著低表达（P<0.05）。结合临床数据分析显示hsa_circ_0006834的表达与HCC患者的血管侵犯和巴塞罗那（BCLC）分期呈显著负相关，与无复发生存期和总体生存期呈显著正相关（P<0.05），可作为独立的预后因素。ROC曲线预测2年无复发生存期和总体生存期的AUC面积分别为0.750和0.7601，具有良好的预后评估效能。结论 hsa_circ_0006834在HCC组织中低表达，具有作为HCC患者预后评估的新型生物标志物的潜力。

• 慢性间歇性低氧大鼠肾组织差异蛋白的定量分析：基于TMT-PRM技术

  魏 敏, 陈乃洁, 李璟怡, 刘 丹, 沈双宏, 王 丰, 吴润华, 陈 沁

  目的 基于TMT-PRM技术研究慢性间歇性低氧大鼠肾脏组织的蛋白质组学，筛选差异表达蛋白以鉴定潜在的生物标志物。方法 SD大鼠随机分为正常组、实验组（n=10）。实验组放入低氧舱内建立慢性间歇性低氧（CIH）大鼠模型。12周后采集肾脏样本，HE染色观察大鼠肾组织形态变化；提取蛋白并酶解和TMT标记，采用LC-MS/MS鉴定蛋白，软件ProteomeDiscoverer2.4处理数据，进行生物信息学分析，以倍数变化1.2以上或低于0.83为标准，t检验P<0.05作为差异表达蛋白，并应用PRM技术验证候选蛋白的表达情况。结果 CIH引起肾脏损伤，肾小球形态不规则，肾小管上皮细胞肿胀等。实验组与正常组比较，筛选出差异表达蛋白有31种，其中表达上调的22种，表达下调的9种。GO功能富集分析显示差异表达蛋白主要参与细胞黏附、缺氧应激、钙离子等生物学过程。KEGG通路富集分析结果显示差异表达蛋白涉及PPAR、AMPK、代谢途径等信号通路。PRM相对定量分析的目标蛋白中进行筛选，P07379（PCK1）、P19132（Fth1）、Q5XI79（Ndufaf7）3个蛋白与TMT定量蛋白质组结果趋势一致。结论 应用TMT-PRM技术在慢性间歇性低氧大鼠肾组织筛选出差异表达蛋白有31种，其中P07379（PCK1）、P19132（Fth1）、Q5XI79（Ndufaf7）可能是与慢性间歇性低氧大鼠肾损伤密切相关的关键蛋白。

• 不同滴度MOG-IgG抗体在MOG抗体相关疾病中的诊断和临床意义：一项单中心回顾性研究

  李子昂, 王冬梅, 陈金玉, 黄小珍, 吴永明, 胡亚芳

  目的 总结本中心外周血髓鞘少突胶质细胞糖蛋白（MOG）抗体阳性患者的临床特征，探讨不同滴度抗体对诊断的意义。方法 对2020年12月~2022年12月入院的血清MOG抗体阳性患者进行了回顾性研究。收集患者的一般人口学特征、实验室检查结果、影像学特点、治疗及预后信息。以1∶100作为分界值将患者分为高、低两个滴度组，对两组患者的特征进行对比分析。结果 共纳入36例患者，其中28例被诊断为MOGAD（77.78%，低滴度15例，高滴度13例）。MOGAD的临床特征与既往研究报道基本一致，临床表现略有不同，感觉异常发生率较高（52.78%），视力丧失的比例较低（25%）。磁共振成像结果显示脑室周围白质为常见病变部位（45.71%）。高滴度组患者血清淋巴细胞水平明显降低（P=0.025），中性粒细胞与淋巴细胞比值（NLR）较高（P=0.045），血清游离甲状腺素（FT4）水平较高（P=0.033），脑脊液中葡萄糖水平较高（P=0.007）。结论 低滴度和高滴度的MOG-IgG在MOGAD的诊断价值上相似，且不同滴度结果可能与疾病严重程度和应激水平有关。

• 粪便蛋白Luminex液相芯片检测系统构建及其对结直肠肿瘤早期诊断的价值

  李 静, 殷丽霞, 张 敏, 夏勇生, 左芦根, 刘牧林, 胡建国

  目的 基于Luminex液相芯片检测系统构建粪便人源性蛋白诊断体系，并评估其对结直肠肿瘤的早期诊断价值。方法 收集2021年1月~2023年1月蚌埠医学院第一附属医院收治的结直肠癌（CRC）患者70例为CRC组、结直肠腺瘤（CRA）患者42例为CRA组，以及同期健康对照（HC）受试者38例为HC组。收集各组受试者粪便，使用Tris-Hcl缓冲液提取粪便总蛋白，通过Luminex液相芯片检测技术分析3组受试者粪便中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、人源性视黄醇结合蛋白4（RBP4）、甲壳素酶-3样蛋白1（CHI3L1）和补体成分3a（C3a）的水平差异；收集受试者外周血，分离血清检测癌胚抗原（CEA）和糖类抗原19-9（CA19-9）的水平；使用受试者工作曲线（ROC）分析MMP-9、RBP4、CHI3L1和C3a联合以及CEA和CA19-9联合对CRC、CRA、CRC和CRA的诊断效能，并比较两种组合诊断效能的差异。结果 CRC组患者粪便中MMP-9、RBP4、CHI3L1和C3a水平均显著高于HC组（P<0.05），CRC组粪便中MMP-9和CHI3L1水平显著高于CRA组（P0.05）；另外，CRC患者外周血中CEA和CA19-9水平均显著高于HC组和CRA组（P0.05）。ROC曲线分析显示，MMP-9、RBP4、CHI3L1和C3a联合诊断CRC的灵敏度为91.4%，特异度为100.0%，联合诊断CRA的灵敏度为81.0%，特异度为89.5%，联合诊断CRC和CRA的灵敏度为83.9%，特异度为97.4%。Z检验比较分析显示，粪便蛋白MMP-9、RBP4、CHI3L1和C3a联合诊断CRC，CRA以及CRA和CRC的效能显著优于外周血肿瘤标志物CEA和CA19-9（P<0.05）。结论 Luminex液相芯片检测粪便人源性蛋白RBP4、MMP-9、CHI3L1、C3a对结直肠肿瘤早期诊断具有价值且优于外周血肿瘤标志物CEA和CA19-9，具有较高的临床应用推广意义。

• 脂肪组织黏膜相关恒定T细胞通过分泌白介素4调节小鼠脂肪棕色化

  叶 潇, 宋迎香, 赵 瑜, 朱大龙

  目的 探究黏膜相关恒定T（MAIT）细胞与脂肪棕色化之间的关系以及调节脂肪棕色化的分子机制。方法 构建MAIT细胞功能缺陷小鼠模型，对比野生型小鼠及MAIT细胞缺陷小鼠，通过Western blot和RT-PCR检测冷刺激前后小鼠脂肪棕色化标志物的水平差异，并通过流式细胞术检测了小鼠脂肪组织内MAIT细胞在冷刺激前后数量、活化水平以及细胞因子分泌能力的差异。采用MAIT细胞与脂肪细胞共培养的方式，通过Western blot和RT-PCR检测是否存在MAIT细胞以及是否加入白介素4（IL-4）封闭抗体的条件下脂肪细胞棕色化标志物的表达差异。利用MAIT细胞缺陷的小鼠模型，通过代谢笼、免疫组化、Western blot和Seahorse方法检测MAIT细胞缺陷小鼠在冷刺激条件下的脂肪棕色化相关指标。结果 Western blot和RT-PCR结果显示小鼠冷刺激后脂肪组织棕色化标志物UCP-1、PGC1-α的表达水平均上调，在此情景下小鼠脂肪组织内MAIT细胞数量差异无统计学意义（P>0.05），CD69的表达水平上调（P<0.05），效应细胞因子IL-4的表达水平上调（P<0.05）。体外共培养实验显示，脂肪细胞与MAIT细胞共培养后的棕色化水平上调（P<0.05），若阻断IL-4信号则棕色化水平下调（P<0.05）。对MAIT细胞缺陷的小鼠进行冷刺激后，其能量消耗水平低于野生型小鼠（P<0.05），脂肪棕色化水平低于野生型小鼠（P<0.05），且脂肪细胞代谢水平低于野生型小鼠。结论 本研究首次通过MAIT细胞功能缺陷小鼠模型验证MAIT细胞参与脂肪棕色化，动物实验及体外实验进一步显示冷刺激通过促进MAIT细胞分泌IL-4调控脂肪细胞棕色化。

• 七氟醚下调TRPV4/C-PLA2信号通路活性减轻呼吸机诱导的大鼠肺损伤

  王文法, 杨 泳, 王 莉, 郭 欣, 田玲芳, 王 鹤, 胡玉珍, 刘 睿

  目的 探讨七氟醚抗呼吸机诱导的肺损伤（VILI）的保护作用机制。方法 32只SPF级SD大鼠随机平均分为4组（8只/组）：机械通气（MV）组、MV+七氟醚组（MS组）、MV+七氟醚+瞬时受体电位香草酸亚型4（TRPV4）激动剂组（MST组）和MV+七氟醚+溶剂组（MSV组）。ELISA检测实验大鼠肺组织花生四烯酸（AA）含量；Western blotting检测TRPV4、胞质型磷脂酶A2（C-PLA2）和肌球蛋白轻链激酶（MLCK）蛋白表达水平；以MLCK表达水平、肺通透性指数和肺湿/干比值反映肺通透性，支气管肺泡灌洗液（BALF）中多形核白细胞计数和肺组织髓过氧化物酶活性用于反映肺炎症反应程度，并对肺组织形态学进行评分。结果 与其余3组相比，MV组实验大鼠肺组织TRPV4和C-PLA2表达增高（P<0.05），同时伴有明显的肺通透性增加和肺炎症反应（P0.05）；与MST组相比，MS组和MSV组实验大鼠AA生成明显减少（P<0.05），TRPV4和C-PLA2表达下调（P<0.05），肺通透性增加和肺炎症反应明显减轻（P<0.05）。结论 七氟醚下调TRPV4/C-PLA2信号通路发挥其抗VILI保护作用。

• 冬凌草甲素逆转硫代乙酰胺对破骨和成骨细胞分化的机制研究

  金晓丽, 许 嘉, 陈煊威, 陈 瑾, 黄 慧, 张 婷, 任 军, 许 健

  目的 探究冬凌草甲素（ORI）和硫代乙酰胺（TAA）对破骨分化和成骨分化的作用及其机制。方法 CCK-8检测TAA和ORI对RAW264.7和骨髓间充质干细胞（BMSCs）增殖活力的影响；TRAP染色和免疫荧光染色检测TAA和ORI对RAW264.7破骨分化的影响；Western blot检测TAA和ORI对破骨特异性蛋白表达的影响；免疫荧光和流式细胞术检测TAA和ORI对p65核易位和活性氧生成的影响；碱性磷酸酶和茜素红染色检测TAA和ORI对BMSCs成骨分化的影响；Western blot法检测TAA和ORI对BMSCs成骨和凋亡相关蛋白表达的影响。结果 破骨诱导分化实验中，与TAA组相比，TAA+ORI组破骨细胞生成减少（P<0.01），MAPK/NF-κB通路明显被抑制（P<0.01），p65核易位水平显著降低，细胞内活性氧生成减少（P<0.01）。此外，与对照组相比，TAA能够抑制BMSCs ALP活性和钙化结节形成（P<0.01），并且诱导BMSCs凋亡。与TAA组相比，TAA+ORI组BMP-2/RUNX2表达增加，ALP活性增强（P<0.01），钙盐结节形成增加（P<0.01），细胞凋亡水平降低。结论 ORI可以调控MAPK/NF-κB预防TAA诱导的破骨分化，并且调控BMP-2/RUNX2缓解TAA抑制的骨形成。

• 主动脉瓣复合体钙化分布密度是国产自膨式瓣膜TAVR术后传导障碍的危险因素

  王蔚然, 孙泽瑜, 辛 然, 丁熠璞, 刘子暖, 王 玺, 王 晶, 单冬凯, 刘长福

  目的 评估主动脉瓣复合体（AVC）不同区域钙化分布密度对应用国产自膨式瓣膜（SEV）行经导管主动脉瓣置换（TAVR）术后新发传导障碍（CB）的影响。方法 纳入2016年1月~2022年12月接受国产Venus-A人工瓣膜置换术的重度主动脉瓣狭窄患者共73例，根据术后是否出现新发CB分为CB组和无CB组，比较两组基线数据、影像资料和手术数据情况。单因素、多因素Logistic回归分析TAVR术后新发CB的独立危险因素。应用受试者工作特征（ROC）曲线及DeLong检验，分析各危险因素及联合指标预测效能。结果 73例TAVR患者中，18例（24.7%）术后新发CB。CB组具有更大的植入深度（6.77±2.45 mm vs 5.11±3.28 mm，P=0.027），且室间隔膜部长度与植入深度差值（MSID）明显小于无CB组（0.68±3.49 mm vs 2.82±3.88 mm，P=0.036）。钙化分布方面，CB组设备着陆区（DLZ）左冠窦（LCS）的钙化分布密度明显高于无CB组[10.34（2.50，48.35）×102 mm3/mm2 vs3.27（0.00，13.79）×102 mm3/mm2，P=0.026]。多因素Logistic分析发现，DLZ-LCS钙化分布密度、MSID是TAVR术后新发CB的独立危险（保护）因素。ROC曲线显示，MSID、DLZ-LCS钙化分布密度预测CB的曲线下面积（AUC）分别为0.775和0.716，联合指标预测具有最大的AUC（0.890），与单独指标比较差异均有统计学意义（P=0.041 vs MSID；P=0.027 vs DLZ-LCS钙化分布密度）。结论 DLZ-LCS钙化分布密度是国产SEV的TAVR术后新发CB的独立危险因素，联合MSID可以有效预测TAVR术后的传导并发症。

• PLXNA1在肝癌中高表达并影响患者的生存预后及其免疫微环境

  苏莉莉, 梁晚晴, 吕振宇, 韩 啸

  目的 筛选在肝细胞癌（HCC）中高表达的免疫相关基因，研究PLXNA1在HCC中的表达差异及其对生物学功能、临床意义和免疫微环境产生的影响。方法 利用TCGA数据库和ImmPort网站分析得到在HCC中高表达的免疫相关基因集。利用单变量COX回归和GEPIA、Kaplan-Meier Plotter网站对其进行分析得到了7个与生存预后相关的基因。通过GEO数据库验证PLXNA1在HCC中的表达情况。基于TCGA数据库，采用Kaplan-Meier、timeROC曲线分析PLXNA1的表达对HCC患者生存预后的影响，通过TIMER网站、CIBERSORT、ssGSEA方法分析PLXNA1的表达与免疫细胞浸润之间的关系。通过IHC实验研究PLXNA1在HCC与癌旁中的表达情况及其对患者生存预后的影响。通过qRT-PCR实验检验其在HCC细胞中的表达情况。利用CCK-8、transwell实验检测si-NC、si-PLXNA1-1、si-PLXNA1-2组中SMMC-7721细胞的增殖、迁移能力。结果 在GSE64041数据集中，PLXNA1在HCC中高表达（P<0.001）。TCGA数据库中：PLXNA1可以较为有效的评估患者的预后风险，并且其在HCC中的高表达与患者的预后不良相关（P=0.025）。PLXNA1的表达与免疫细胞的浸润程度显著相关（P<0.05）。IHC实验结果显示：PLXNA1在HCC组织中高表达，其中PLXNA1高表达组患者的生存率较低（Log-rank P<0.01），PLXNA1的表达对HCC具有显著的诊断价值（AUC=0.9346）。PLXNA1在SMMC-7721细胞中的表达量高于HL-7702细胞。PLXNA1敲低组的细胞增殖、迁移能力下降（P<0.01）。结论 免疫相关基因PLXNA1在HCC中高表达，其促进了细胞的迁移和增殖能力，并且能够影响HCC患者的生存、预后以及免疫微环境。

• 经胸骨上段小切口行主动脉手术的学习曲线及临床疗效

  王梓凝, 肖苍松, 李双磊, 迟海涛, 王军惠, 陈 磊, 赵 强, 杨 明

  目的 探讨经胸骨上段小切口行主动脉夹层手术和非夹层主动脉手术的学习曲线和临床疗效。方法 回顾分析同一手术团队经胸骨上段小切口行主动脉夹层和非夹层主动脉手术的围术期资料。根据体外循环时间和主动脉阻断时间，采用累计求和（CUSUM）分析法及拟合曲线分别绘制夹层手术组和非夹层手术组的学习曲线，根据所得曲线的临界点将整个过程分为提高期和熟练期，对比两个阶段的围术期各项指标随时间的变化趋势分析学习曲线，验证临界点是否为度过学习曲线所需的手术例数，并明确熟练掌握胸骨上段小切口主动脉手术后的安全性和近期疗效。结果 共107例患者纳入研究，根据完善的术前检查分为两组：主动脉夹层组47例，术式为升主动脉置换+弓部置换+降主动脉支架植入和/或主动脉根部处理；非夹层组60例，术式为主动脉根部手术和/或升主动脉置换。夹层组中男37例、女10例，体外循环时间和主动脉阻断时间的最佳拟合方程分别为y=-0.019x3+0.251x2+28.852x-6.076（x为手术例数，最优拟合系数R2=0.918，P<0.05）和y=-0.015x3-0.093x2+34.799x-27.316（R2=0.92，P0.05）；熟练期的围术期指标明显优于提高期，该临界点为度过学习曲线所需的手术例数。非夹层主动脉组中男45例、女15例，体外循环时间和主动脉阻断时间的最佳拟合方程分别为 y=0.013x3-1.826x2+62.353x +193.189（R2=0.906，P<0.05）和 y=0.009x3-1.416x2+49.389x +177.335 (R2=0.90，P<0.05），以22例为界将非夹层主动脉组分为提高期和熟练期，两阶段术前基线资料除二次开胸例数[8（36.36%）vs 1（2.63%），P<0.001]外差异无统计学意义；熟练期的围术期指标同样优于提高期，该临界点为度过学习曲线所需的手术例数。经胸骨上段小切口行夹层和非夹层手术在度过学习曲线后安全性和近期疗效好。结论 经胸骨上段小切口行主动脉夹层和非夹层主动脉手术过程安全，夹层手术经约30例后可熟练掌握此技术；非夹层主动脉手术经约20例后可熟练掌握，与夹层手术相比学习曲线较短。两组熟练掌握后均可提高术后近期疗效。

• 西达本胺对食管鳞癌细胞的抗肿瘤作用及机制

  高曼棋, 赵宝生, 杨文倩, 唐家萍, 刘玉珍

  目的 研究西达本胺对食管鳞癌细胞(ESCC)的增殖、周期、凋亡、皮下移植瘤的影响及作用机制。方法 KYSE-150细胞、KYSE-450细胞、KYSE-510细胞分为对照组和不同浓度西达本胺（5、10、20、40 μmol/L）处理组。MTT、克隆形成实验、流式细胞术分别检测西达本胺对细胞增殖、细胞克隆形成、细胞凋亡、细胞周期的影响。Western blot检测cleaved caspase-3、cleavedPARP、p21、cyclin D1、p-Akt、p-ERK1/2、γH2AX、H3K9ac、Ki-67水平。在食管癌细胞裸鼠移植瘤模型中，每3 d观察腹腔注射20 mg/kg西达本胺（3 d/次）对肿瘤大小和裸鼠质量的影响，并采用免疫组化检测肿瘤组织中Ki-67和CD31的表达。小管形成实验检测西达本胺对人脐静脉内皮细胞（HUVECs）小管形成的影响。结果 西达本胺抑制食管癌细胞增殖及克隆形成（P<0.05）。西达本胺组细胞凋亡率较对照组增加，G0/G1期比例增加（P<0.01）。西达本胺上调cleaved caspase-3、cleaved PARP、p21，下调cyclin D1、p-Akt、p-ERK1/2，上调γH2AX、H3K9ac，下调Ki-67（P<0.01）。与对照组相比，西达本胺组肿瘤体积减小（P<0.05），瘤质量比降低（P<0.01），肿瘤Ki-67和CD31表达降低（P<0.01）。西达本胺抑制HUVECs小管形成（P<0.05）。结论 西达本胺抑制食管鳞癌细胞增殖、诱导细胞凋亡、阻滞细胞周期，可能与抑制PI3K/Akt、ERK1/2通路及增加DNA损伤相关。西达本胺通过抑制食管鳞癌细胞增殖和组织血管生成抑制食管鳞癌细胞皮下成瘤。

• 司美格鲁肽对高糖诱导的心肌成纤维细胞增殖的作用研究

  李京娟, 李凡凡, 牛 璐, 安斌斌, 成晓琼, 刘媛媛, 王金羊

  目的 探讨司美格鲁肽对高糖诱导的心肌成纤维细胞（CFs）增殖中的作用，及其可能的机制。方法 取原代小鼠CFs，通过CFs的特异性抗体波形蛋白Vimentin 鉴定后进行下一步实验。以25 mmol·L-1葡萄糖刺激细胞增殖，5~20 nmol·L-1司美格鲁肽进行干预，并筛选浓度。分别设置正常组：含5.5 mmol·L-1葡萄糖DMEM；高糖组：25 mmol·L-1葡萄糖；司美格鲁肽组：25 mmol·L-1葡萄糖+10 nmol·L-1司美格鲁肽。应用Cell Cycle Staining Kit检测细胞周期；RT-qPCR方法检测α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、TGF-β1、Smad3 的mRNA表达变化；用ELISA检测Ⅰ型胶原（CoLⅠ）和Ⅲ型胶原（CoLⅢ）。结果 与对照组相比，高糖诱导的CFs增殖明显增强（P<0.05），细胞周期中S期细胞比例增加；与高糖组相比，司美格鲁肽抑制了CFs的增殖（P<0.05），减少CFs细胞周期中S期细胞比例。与对照组相比，高糖组α-SMA、CoLⅠ、CoLⅢ显著增加（P<0.01）；与高糖组相比，司美格鲁肽组α-SMA、CoLⅠ、CoLⅢ显著减少（P<0.01）。与对照组相比，高糖组TGF-β1、Smad3显著增加（P<0.01）；与高糖组相比，司美格鲁肽组TGF-β1、Smad3显著减少（P<0.01）。结论 司美格鲁肽可以抑制高糖诱导的CFs增殖和胶原蛋白的合成，进而发挥抗心肌纤维化的作用，其机制可能与下调TGFβ/Smad3信号通路有关。

• 不同牙位及髓腔固位型深度影响髓超嵌体口内数字印模精度的体外分析

  甘红琴, 孙舒雨, 田瑞雪, 刘 芳, 李建成, 谢小飞

  目的 评价牙齿位置和髓腔固位型深度对髓超嵌体口内数字印模准确性的影响。方法 选取右上颌第1磨牙（16）和右下颌第1磨牙（46）的解剖牙树脂模型各4颗，在模型牙上制备髓腔固位型深度为2、3、4、5 mm的髓超嵌体预备体。使用显微CT获得8个参考扫描。导出所有扫描数据，通过Mimics 2021软件三维重建获得参考模型。使用口腔扫描仪获得了每个髓超嵌体预备体的10个数字印模为实验模型。使用3D分析软件Gomagic Wrap 2017进行三维模型的对比分析。计算平均绝对偏差值，以评估数字模型的精确度。结果 以牙位分组时：16的真实度与46的真实度没有显著差异。16的精确度与46的精确度没有显著差异。两牙齿间16平均最大正偏差和负偏差显著小于46（P<0.05），而两颗牙齿各自的平均最大正偏差大于平均最大负偏差（P<0.05）。以洞型深度分组时：5 mm组的真实度显著低于2 mm组、3 mm组及4 mm组（P<0.05）。精确度方面2 mm组显著高于4 mm组及5 mm组（P<0.05），3 mm组显著高于5 mm组（P<0.05）。平均最大正偏差和平均最大负偏差在2 mm组显著低于5 mm组（P<0.05），与其余两组相差较小。结论 牙齿位置对髓超嵌体口内数字印模真实度存在影响，髓腔固位型深度对髓超嵌体口内数字印模精确度有所影响，且大体趋势为随着深度的增加偏差随之变大。

• SPP1在肾缺血再灌注诱导的急性肾损伤中的作用及机制

  虞亘明, 王鑫玮, 骆金光, 苏 萧, 陶怀祥, 闻志远, 关 翰

  目的 探究SPP1基因在肾脏缺血再灌注损伤（IRI）中的作用及机制。方法 GSE131454数据集显示了肾I/R组和Sham组基因的差异表达。在GSE131454数据库中搜索，通过相关文献我们选择了SPP1作为研究对象。12只SD大鼠随机分为缺血再灌注组（IRI组）和假手术组（Sham组），各6只，IRI组使用无损伤显微血管夹钳夹肾蒂使肾脏缺血30 min，Sham组不做处理。采集肾组织并检测两组大鼠血清肌酐、尿素氮的变化，PAS染色检测两组肾脏组织病理变化，免疫组化检测SPP1基因和α-SMA基因表达变化。免疫荧光染色检测肾脏SPP1和Caspase-3的表达。肾小管上皮HK-2细胞缺氧复氧（H/R）模型分为Control组和H/R组，Western blot检测各组SPP1、Caspase-3、Kim-1蛋白的相对表达。HK-2细胞分别转染si-NC和si-SPP1，检测各组干扰效率后分为si-NC+Control组、si-NC+H/R组、si-SPP1+H/R组，Western blot检测各组细胞中Caspase-3、Kim-1蛋白相对表达量，流式细胞术检测各组细胞凋亡率。结果 IRI组大鼠血清肌酐、尿素氮相比Sham组含量显著增加（P<0.05），并观察到严重的肾小管上皮细胞脱落及坏死。在大鼠肾脏缺血再灌注损伤后，肾脏组织中SPP1和α-SMA含量显著增加（P<0.05）。与Sham组相比，IRI组大鼠组织显示SPP1和Caspase-3的荧光强度显著升高（P<0.05）。肾小管上皮细胞缺氧复氧后SPP1、Caspase-3、Kim-1蛋白表达显著增加（P<0.05）。si-SPP1组细胞SPP1蛋白表达低于si-NC组细胞（P<0.05）。si-NC+H/R组的Caspase-3、Kim-1蛋白相对表达量和凋亡率均高于si-NC+Control组（P<0.05），si-SPP1+H/R组的Caspase-3、Kim-1蛋白相对表达量和调亡率均低于si-NC+H/R组（P<0.05）。结论 SPP1在肾脏缺血再灌注损伤中的表达上调，下调SPP1表达可抑制H/R肾小管上皮细胞调亡。

• 基于多序列MRI的3D关系注意力网络预测HLA-B27阴性中轴性脊柱关节病

  邹青清, 王梦虹, 陆紫箫, 赵英华, 冯前进

  目的 建立一种新的3D多序列关系注意力网络，通过探索不同磁共振成像（MRI）序列图像的互补和相关信息，提升对人类白细胞抗原（HLA）-B27阴性中轴性脊柱关节病（axSpA）的诊断性能。方法 回顾性收集2010年1月~2021年8月南方医科大学第三附属医院（TAH组）的375例和南海医院（NHH组）的49例HLA-B27阴性参与者（TAH组：164例axSpA，211例非axSpA；NHH组：27例axSpA，22例非axSpA）的两种参数MRI，包括T1加权图像（T1WI）和压脂序列MRI（FS-MRI），以及相关临床数据。提出一个基于多序列MRI的3D关系注意力网络MSFANet，实现对HLA-B27阴性axSpA与非axSpA的自动鉴别诊断。MSFANet由一个浅层共享特征模块和一个类感知特征学习模块组成，其中类感知特征学习模块采用3D多序列关系注意力机制对多序列MRI特征进行细化和融合。提出一种混合损失函数，通过学习不同支路的损失权重系数来提升MSFANet对序列特征的识别能力，从而增强分类性能。结果 实验结果表明，MSFANet优于其它几种最先进的多序列融合算法，其中内部验证集上的AUC、准确度、敏感度和特异度分别达到了0.840，77.93%，83.70%和70.29%，独立外部验证集（NHH）上的上述性能分别达到了0.783，74.47%，82.43%和70.40%。各项差异均具有统计学意义（P<0.05）。此外，消融实验显示，相同框架下，MSFANet的性能优于基于单序列MRI的模型，证实了融合多序列MRI的有效性和必要性。深度可视化技术显示MSFANet在分类过程中集中于学习图像异常区域的信息。结论 本研究成功构建基于多序列MRI的3D深度神经网络对HLA-B27阴性axSpA和非axSpA进行鉴别诊断，并验证了采用多序列关系注意力机制对提升网络分类性能的有效性。

• 肌肽对糖尿病肾病大鼠肾组织AKT/mTOR通路及自噬的影响

  任 毅, 卢金莹, 于 露, 李宗泽, 王 高, 杨 菁

  目的 探究肌肽对糖尿病肾脏病变的保护作用及机制。方法 将70只大鼠随机分成对照组（CON组，n=14）和高糖高脂组（n=56）。CON组普通饲料喂养，高糖高脂组采用高糖高脂喂养，并结合腹腔注射链脲佐菌素建立损伤模型，将制备损伤模型成功的大鼠随机分为糖尿病组（DM组，n=12）及肌肽低（Car-L，n=13）、中（Car-M，n=13）、高剂量组（Car-H，n=13），分别按照0、100、300和900 mg/(kg·d)肌肽灌胃。测量大鼠体质量及血糖，实验结束时收集大鼠24 h尿液、血清及肾脏，分别测量尿量、尿蛋白含量、血肌酐（Scr）、肾脏质量及HE染色，TBA法检测肾脏组织丙二醛（MDA）含量、NBT法检测超氧化物歧化酶（SOD）活性、Western blot法检测肾脏组织中蛋白激酶B（AKT）、p-AKT、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、p-mTOR、微管相关轻链蛋白1轻链3（LC3）、选择性自噬接头蛋白（p62）的表达。结果 与CON组相比，DM组大鼠出现毛色暗淡、毛发潮湿等现象；体质量下降，血糖、尿蛋白含量、24h尿量、Scr、肾脏质量均上升；肾小球肿胀变形，肾小管狭窄；SOD活性下降、MDA含量上升；肾脏组织中p-AKT/AKT和p-mTOR/mTOR比值降低，LC3II/I比值和p62蛋白表达增高（P<0.01）。与DM组相比，肌肽各组的大鼠毛发恢复光泽、体质量回升，血糖、尿蛋白含量、24 h尿量、Scr、肾脏质量有所下降；肾小球肿胀变形、肾小管狭窄程度有所缓解；SOD活性上升、MDA含量下降（P<0.01）；肾脏组织中p-AKT/AKT和p-mTOR/mTOR比值升高、LC3 II/I比值降低、p62蛋白表达降低（P<0.01）。结论 肌肽对糖尿病大鼠肾脏病变具有保护作用，其保护作用与肌肽抑制氧化应激，激活AKT/mTOR通路，进而恢复自噬功能有关。

• DelbetⅡ、Ⅲ型儿童及青少年髋部骨折的手术效果及并发症分析

  孔 圳, 钟 华, 刘永强, 孙永建, 杨少铮, 纪悦伦, 吴伟平

  目的 探讨DelbetⅡ、Ⅲ型儿童及青少年髋部骨折的手术效果及并发症分析。方法 回顾性分析南方医科大学第五附属医院及第三附属医院2013年1月~2022年1月收治的DelbetⅡ、Ⅲ型儿童及青少年髋部骨折的患者资料。根据手术方式，分为闭合复位内固定组及切开复位内固定组。记录各组手术时间、术后愈合时间，Ratliff标准髋关节功能结果。统计骨骺早闭例数、股骨头坏死例数等并发症并作出对比分析。结果 共收集DelbetⅡ、Ⅲ型儿童及青少年髋部骨折患者42例，年龄2~15岁，平均8.19±3.23岁。其中男24例，女18例；Delbet骨折分型Ⅱ型22例、Ⅲ型20例。闭合复位内固定治疗19例，切开复位内固定治疗23例。所有患者随访时间13~84月，平均36.04±8.23月。闭合复位内固定的时间较切开复位内固定术少（P0.05）。所有患者髋关节功能总体优良率90.48%。两组比较无明显差异（P>0.05）。共发生骨骺早闭7例，股骨头坏死3例，两组无明显差异（P>0.05）。结论 DelbetⅡ、Ⅲ型儿童及青少年髋部骨折的手术效果确切，若闭合复位可达到解剖复位，建议闭合复位内固定术治疗。骨骺早闭及股骨头坏死仍是儿童及青少年髋部骨折常见且严重并发症，应引起足够重视。

• 基于HMGCR及PPARα信号通路探究雪莲果浸膏对高脂血症大鼠脂质代谢的影响

  龚顺航, 杨 杰, 张金涛, 吴兴林, 江 山, 张誉麟, 龚广斌, 吴 宁, 孙见飞, 吴遵秋

  目的 探究雪莲果（Yacon）浸膏对高脂血症（HLP）大鼠脂质代谢的影响和改善血脂异常的作用机制。方法 随机数表法取10只SD大鼠作为空白组（Normal），正常饮食；另取50只大鼠给予高脂饮食8周建立HLP模型，随机分为模型组（Mod）、非诺贝特阳性对照组（FEN，27 mg/kg），Yacon浸膏高、中、低剂量组（5、2.5、1.25 g/kg），10只/组。各组大鼠给予相应药物灌胃，Normal组、Mod组给予等体积生理盐水，干预8周。观察并记录大鼠体质量变化，采集肝脏、血清标本，计算肝脏系数；ELISA法检测血清中甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平；HE染色法观察肝组织病理变化；qPCR和 Western blot法分别检测3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶（HMGCR）、过氧化物酶增殖物激活受体α（PPARα）、胆固醇7α-羟化酶（CYP7A1）、肉碱棕榈酰转移酶1（CPT-1）mRNA及蛋白表达水平。结果 FEN组和Yacon 5 g/kg组体质量增量、肝脏系数均低于Mod组（P<0.05）；FEN组和Yacon 5 g/kg组血清TG、TC、LDL-C水平均低于Mod组（P<0.05），HDL-C水平高于Mod组（P<0.05）；光镜下观察大鼠肝脏病理组织切片，Mod组可见脂肪样变性和空泡样改变等病理变化，药物各治疗组病理程度明显减轻且具有剂量依赖性；与Mod组相比，FEN组和Yacon 5 g/kg组大鼠肝组织中HMGCR mRNA及蛋白表达水平降低（P<0.001），PPARα、CYP7A1、CPT-1 mRNA及蛋白表达水平升高（P<0.001）。结论 Yacon浸膏可以降低HLP大鼠血清TG、TC水平，其机制可能与抑制肝脏HMGCR的表达和激活PPARα/CYP7A1/CPT-1信号通路，促进脂肪酸β氧化、胆汁酸代谢有关。

• 尿路上皮癌抗原1促进滋养细胞功能及对上皮-间质转化转化的调控作用

  孙建华, 张 逸, 杨丽萍, 周 立, 卢喜洋, 李久现, 陈 萍

  目的 研究尿路上皮癌抗原1（UCA1）对滋养细胞（HTR-8/SVneo）侵袭和迁移能力及上皮-间质转化（EMT）特性的影响，探索UCA1在输卵管妊娠（TP）发生发展过程中的作用及机制。方法 实验设为空白对照组及IL-6刺激组，采用qRT-PCR检测滋养细胞UCA1表达，划痕实验检测细胞迁移功能；通过瞬时转染构建HTR-8/SVneo细胞UCA1沉默细胞模型，细胞设为空白对照组及UCA1沉默组，分别采用划痕实验和transwell侵袭实验、qRT-PCR及Western blot实验检测UCA1对HTR-8/SVneo细胞迁移、侵袭能力及EMT标志物表达水平的影响。结果 IL-6干预后HTR-8/SVneo细胞迁移距离增加，UCA1表达显著上调（P<0.01）；沉默UCA1后HTR-8/SVneo细胞UCA1表达明显下调，迁移距离明显缩短、穿膜细胞个数明显减少（P<0.01），EMT上皮标志物E-cadherin mRNA表达显著上调（P<0.01），间质标志物integrin β3、Vimentin、N-cadherin mRNA表达下调（P<0.01、P<0.05、P<0.01）；EMT上皮标志物E-cadherin蛋白表达上调（P<0.01），间质标志物integrin β3、Vimentin、N-cadherin蛋白表达下调（P<0.01）。结论 UCA1可能是促进TP发生发展的关键基因，有望成为该疾病新的治疗靶点。