南方医科大学学报杂志

南方医科大学学报杂志2019年第04期

• OAS1基因多态性与儿童肠道病毒71型感染合并中枢神经系统受累相关

  李亚萍,翟嵩,王文俊,邓慧玲,李梅,贾晓黎,党双锁

  目的探讨OSA1基因多态性与肠道病毒71型（EV71）所致中枢神经系统感染的关联性。方法选取180例EV71感染患儿进行病例对照研究，其中72例为无任何并发症的轻症，108例合并中枢神经系统受累，201例常规体检的儿童作为健康对照。应用SNPscan 分型技术分析OAS1 基因rs2660 和rs1131454 的单核苷酸多态性（SNP）。结果病例组和对照组在rs2660 和rs1131454基因型和等位基因的分布上无显著差异。OAS1基因rs2660多态性在中枢神经系统受累儿童和轻度EV71感染者之间有显著差异，中枢神经系统受累患儿AG基因型频率较高（OR=2.27，95% CI：1.07-4.85)，GG基因型频率较低（OR=0.27，95%CI：0.08-0.97）。rs1131454基因型和等位基因的分布在中枢神经系统受累患儿和轻症EV71感染儿童之间无显著差异。结论OAS1基因rs2660 和rs1131454多态性和EV71感染易感性之间无显著相关。OAS1基因rs2660多态性与EV71感染合并中枢神经系统受累易感性相关，携带OAS1 rs2660 AG基因型的患儿感染后合并中枢神经系统受累的概率更高。

• PSMA7在胃癌中的表达及对胃癌增殖、侵袭迁移及成瘤能力的影响

  夏淑晶,张莉莉,成凤干,冯振卿,陆伦根

  目的研究PSMA7在胃癌中的表达及其对胃癌增殖、侵袭迁移及裸鼠皮下成瘤能力的影响。方法收集60例胃癌患者的癌组织及配对的癌旁组织，应用免疫组化法检测胃癌和配对癌旁组织中PSMA7的表达水平；应用慢病毒转染技术在胃癌细胞株SGC7901中干扰PSMA7；应用Cell Counting Kit-8（CCK-8）和细胞克隆形成实验检测胃癌细胞增殖能力的变化，Transwell实验检测胃癌细胞侵袭迁移能力的变化；稳转细胞株构建裸鼠皮下移植瘤模型，研究干扰PSMA7对皮下移植瘤的影响。结果免疫组化结果显示PSMA7在胃癌组织中的表达水平显著高于其配对的癌旁组织（P<0.05）；在人胃癌细胞株SGC7901中下调PSMA7表达能够显著抑制肿瘤细胞的增殖、侵袭迁移能力（P<0.05）；在BALB/c小鼠皮下移植瘤模型中干扰PSMA7的表达能够明显抑制皮下移植瘤的生长（P<0.05）。结论PSMA7在胃癌组织中高表达，干扰PSMA7抑制胃癌细胞增殖、侵袭迁移及裸鼠皮下成瘤的能力。

• 三七总皂苷对大鼠肝移植排斥反应的影响及相关机制

  张先兵,李勋,熊平,易传超,陈曦

  目的探讨三七总皂苷（PNS）对Kupffer细胞（KCs）功能状态、肝移植术后免疫环境的影响，及其相关机制。方法分离大鼠KCs，吞墨台盼蓝鉴定KCs活性，细胞实验分LPS（-）组、LPS（+）+ PNS（0 μmol）组、LPS（+）+ PNS（10 μmol）组，、LPS（+）+PNS（20 μmol）组，Western blot、ELISA检测各组细胞及上清液炎症因子和氧化应激产物的表达，免疫荧光检测KCs CD206的表达，Western blot 检测NF-κB和Keap1-Nrf2-ARE通路蛋白表达。建立大鼠移植模型，分为SHAM组、LT（PBS处理）组和PNS（200 mg/kg）组，术后检测各组肝功能、炎症因子、肝组织病例、凋亡情况，并观察大鼠生存时间。结果随着PNS浓度的增加，KCs分泌促炎因子和氧化应激产物MDA水平逐渐降低，明显低于PNS（0 μmol）组，而抗炎因子IL-10以及抗氧化应激产物SOD水平逐渐升高，明显高于PNS（0 μmol）组，且差异具有统计学意义（P<0.05）。免疫荧光示PNS提高了KCs表型CD206的表达。同时，PNS减少了KCs IRAK4、p-IKKα、p-IκBα、p-p65、Keap1蛋白表达，而Nrf2、ARE蛋白表达水平逐渐升高，且与低PNS浓度组比具有统计学上的差异（P<0.05）。与LT组比，PNS组的大鼠肝移植后肝功能明显改善，促炎因子表达水平降低，肝细胞凋亡减少，肝组织急性排斥病理改变减轻，大鼠生存时间明显增高（P<0.05）。另外，大鼠注射GdCl3封闭KCs功能发现，PNS组出现严重的急性排斥反应，与LT组比较无统计学上差异（P>0.05）。结论PNS能够通过抑制NF-κB和Keap1-Nrf2-ARE通路减少活化KCs的炎症和氧化应激反应，促进KCs向免疫耐受的M2型极化，提高大鼠移植术后的生存时间。

• 硼替佐米与obatoclax双重阻断蛋白质降解途径对人急性T淋巴白血病细胞具有协同抗肿瘤作用

  周丹,戴丽霞,刘小莲,阙富昌,许玉燕,罗昕,祝瑶露,刘叔文,李亦蕾,余乐

  目的探讨硼替佐米联用obatoclax对人急性T淋巴白血病细胞Jurkat是否具有协同抗肿瘤作用。方法MTT法检测单用硼替佐米和联用Bcl-2 抑制剂（obatoclax，AT-101 和ABT-199）对Jurkat 细胞活力的影响。采用Western blot 方法检测药物对Bcl-2 家族蛋白、LC3B、p62、ubiquitin、BiP/Grp78、p-JNK、p-p38和CHOP 蛋白表达的影响。硼替佐米和Bcl-2抑制剂对细胞凋亡的影响。实时荧光定量PCR 检测未折叠蛋白反应（UPR）关键调节因子的mRNA表达水平。斑马鱼异种移植模型研究单药以及两药联用的体内抗肿瘤作用。结果单用硼替佐米和Bcl-2 抑制剂均可抑制Jurkat细胞活力，但联用时仅obatoclax与硼替佐米具有协同细胞毒作用，引起细胞凋亡增多。obatoclax 阻断自噬流，伴随LC3B-II 和p62 的蓄积。此外，单用硼替佐米和obatoclax 可诱导泛素化蛋白的蓄积，两药联用对泛素化蛋白蓄积具有协同作用，与药物联用的协同细胞毒作用实验结果一致。硼替佐米和obatoclax 联用对蛋白酶体和自噬的双重阻断触发了未折叠蛋白反应，诱导细胞凋亡。内质网应激抑制剂牛磺熊去氧胆酸（TUDCA）可减弱硼替佐米和obatoclax 联用的细胞毒作用，减少细胞凋亡。在斑马鱼体内联用硼替佐米和obatoclax显著地减少肿瘤灶形成。结论硼替佐米与obatoclax联用双重阻断蛋白质降解途径对人急性T淋巴白血病细胞具有协同抗肿瘤作用。

• 新型解剖型钛笼可提高终板的支撑强度：基于影像学及生物力学方法

  卢腾,高中洋,贺西京,李家良,刘宁,梁辉,王一斌,闻志靖,张廷,王栋,李浩鹏

  目的评价新型解剖型钛笼（AA-TMC）在单节段及双节段颈前路椎体次全切植骨融合术（ACCF）中与终板的贴合程度以及对手术节段颈椎生理序列的重建效果。方法使用12具颈椎尸体标本完成单节段及双节段ACCF手术，使用AA-TMC进行椎体重建。通过X线测量手术前后手术节段高度及角度以评价AA-TMC对手术节段生理序列的重建效果。同时测量术后AA-TMC与终板之间间隙大小以评价AA-TMC与终板的贴合程度。根据美国材料与实验学会F2267 脊柱植入物沉陷试验标准对比AA-TMC与传统钛笼在终板支撑强度上的差异，评价AA-TMC在防止钛笼下沉方面的效果。结果单节段ACCF手术前后节段高度（23.90±2.18 mm vs 24.23±1.13 mm）及角度（11.62±2.67° vs 12.13±0.69°）之间无统计学差异（P>0.05）。双节段ACCF手术前后节段高度（42.93±3.51 mm vs 43.04±1.70 mm）及角度（15.63±5.06° vs 16.16±1.05°）之间无统计学差异（P>0.05）。AA-TMC与终上下板贴合良好，平均间隙0.37±0.3 mm及0.42±0.28 mm。相比于传统钛笼，单节段及双节段ACCF使用AA-TMC进行椎体重建可显著提高终板支撑强度（单节段ACCF：719.7±5.5 N vs 875.8±5.2 N；双节段ACCF：634.3±5.9 N vs 873±6.1 N），差异具有统计学意义（P<0.05）。结论在单节段及双节段ACCF中使用AA-TMC进行椎体重建可显著提高终板支撑强度，从而有效降低了钛笼下沉发生的可能。并且，使用AA-TMC可有效重建颈椎生理序列。

• 手术切除的结直肠癌组织中的肿瘤干细胞的培养及鉴定

  唐娜,周略,成志强,邓永键,丁彦青

  目的获得结直肠癌患者手术切除癌组织的肿瘤干细胞（CSC），培养并鉴定其干细胞特性。方法通过原代培养手术切除结直肠癌组织获得结直肠癌细胞，再通过有限稀释法和无血清培养法筛选结直肠癌CSC，软琼脂集落实验检测CSC和对照组人结直肠癌细胞株SW480 的增殖能力；用低数量级细胞裸鼠皮下成瘤实验，检测结直肠癌CSC和SW480 的成瘤能力；并运用Western blot及免疫荧光方法，检测CSC和SW480的免疫表型。结果临床结直肠癌标本原代培养的CSC，加入血清培养可使CSC分化。软琼脂集落形成实验结果显示，原代培养的CSC克隆形成率为56.64%和54.45%，对照组人结直肠癌细胞株SW480的克隆形成率为4.41%，CSC与SW480集落形成率的差异具有统计学意义（P<0.01）。裸鼠皮下成瘤实验中，原代培养的CSC皮下注射500 个细胞可形成皮下瘤，而SW480 皮下注射500 个细胞不形成皮下瘤。CSC 表达CD133、CD44，不表达CK7；SW480细胞不表达CD133、CD44，表达CK7。结论原代培养的手术切除结直肠癌组织标本获得的肿瘤细胞，再行无血清培养可形成CSC，鉴定具有CSC的自我更新及分化能力。

• 饮酒与缺血性脑卒中幸存者死亡的关联性

  郑倩雯,李亚文,张露,姚强,张敬,李宓儿,王菊,朱彩蓉

  目的探讨饮酒与缺血性脑卒中幸存者全死因死亡的关系。方法连续入组2010年1月~2018年7月入住四川大学华西医院的首发缺血性脑卒中幸存者，每3个月随访1次，采用卡方检验比较卒中前饮酒者与不饮酒者基线特征的差异，通过构建cox比例风险回归模型，分析卒中前是否饮酒、饮酒年限、饮酒频率、平均每次酒精摄入量及随访期间是否饮酒与幸存者死亡的关联性。结果本研究最终纳入855例缺血性脑卒中幸存者进行分析，其中死亡140例。卡方检验显示卒中前饮酒者与不饮酒者在性别（P<0.001）、每周体育锻炼时间（P=0.035）、是否吸烟（P<0.001）和是否有心脏疾病（P<0.001）方面的差异有统计学意义。多因素Cox回归分析结果提示：随访期间饮酒者（P=0.001）、卒中前饮酒年限小于28年者（P=0.035）以及每月饮酒5~20次的男性和4~9次的女性（P=0.030）死亡风险更低。尚未发现卒中前是否饮酒、平均每次酒精摄入量与缺血性脑卒中幸存者死亡有关。结论卒中前饮酒的年限和频率、随访期间是否饮酒与缺血性脑卒中幸存者全死因死亡有关，建议今后研究者纳入随访期间饮酒行为的具体特征变量，进一步探究饮酒与卒中幸存者死亡的关系。

• 肌萎缩侧索硬化患者的脑脊液存在差异表达蛋白：基于串联质谱标签方法

  苏丹丹,张勇,毕方方,肖波

  目的基于串联质谱标签（TMT）技术，从蛋白质组学层面研究肌萎缩侧索硬化（ALS）患者脑脊液（CSF）中的差异性表达蛋白，探讨ALS发病的机制和相关作用途径。方法选取2017年11月~2018年4月于中国人民解放军联勤保障部队第928医院和中南大学湘雅医院神经内科就诊5例延髓起病ALS患者和5例肢体起病ALS患者，以5例偏头痛及低颅压头痛的患者为健康对照，分别获取CSF，利用串联质谱标签（TMT）技术鉴定CSF中差异性蛋白质，并进行生物信息学分析。结果共鉴定并定量1530种蛋白。延髓起病ALS患者中48种蛋白表达上调，6种蛋白表达下调；肢体起病ALS患者中16种蛋白表达上调，19种蛋白表达下调。GO分析显示这些蛋白均参与细胞生理过程、单器官过程和生物调节等过程，在细胞内和细胞外均有分布，且具有结合功能、催化活性和受体活性等。KEGG通路分析显示，延髓起病ALS患者CSF中上调蛋白参与溶酶体和代谢等3条通路。肢体起病ALS患者CSF中下调蛋白参与补体和凝血级联途径、金黄色葡萄球菌感染和单纯疱疹感染等7条通路，各通路均包含补体成分。结论延髓起病和肢体起病的ALS患者CSF中均存在差异性表达蛋白。溶酶体通路参与延髓起病ALS的发生和发展，免疫反应参与肢体起病ALS的发生和发展。

• 维生素D通过下调miR-21的表达促进人胎盘滋养细胞的迁移和侵袭

  周芝熠,李晓娟,蒋国庆,王珏,钱源

  目的探讨维生素D对microRNA-21表达的调控作用以及对人胎盘滋养细胞迁移、侵袭能力的影响。方法不同剂量维生素D刺激HTR-8/SVneo细胞24、48、72 h后，RT-qPCR 检测microRNA-21表达情况；将miR-21 mimic、miR-21 mimic-nc、miR-21 inhibitor和miR-21 inhibitor-nc分别转染至HTR-8/SVneo细胞，或将miR-21 mimic、miR-21 inhibitor联合维生素D共同刺激细胞，Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力，western blot 检测E-cadherin、Fibronectin、MMP9的蛋白表达水平。结果维生素D刺激HTR-8/SVneo细胞后抑制了micoRNA-21的表达，且抑制作用呈浓度-时间依赖性增强。单独转染miR-21 mimic抑制HTR-8/SVneo细胞的迁移、侵袭能力，E-cadherin表达水平增加，Fibronectin、MMP9表达水平降低；联合维生素D共同刺激细胞则可以减弱该作用。单独转染miR-21 inhibitor 促进了HTR-8/SVneo 细胞的迁移、侵袭能力，E-cadherin 表达水平降低，Fibronectin、MMP9表达水平增加；联合维生素D共同作用与单细胞独转染miR-21 inhibitor相比，细胞迁移、侵袭能力以及蛋白水平无明显改变。结论维生素D可能通过下调microRNA-21的表达来影响子痫前期发生发展。

• 性格与亚健康的关系：基于中国四省14岁及以上城镇居民调查结果

  薛允莲,许军,刘贵浩,冯叶芳,许梦瑶,谢娟,蒋丽洁

  目的探讨性格对亚健康的直接关系及通过挫商和应激事件产生的间接关系。方法采用多阶段分层抽样方法对我国四省份14岁以上的城镇居民进行调查，并对4517名符合条件城镇居民进行研究分析。采用协方差分析方法分析校正人口学特征和生活方式影响后，性格对亚健康的独立相关关系；结构方程模型分析性格、挫商、应激事件与亚健康的关系路径；bootstrap进行性格对亚健康的直接效应和间接效应的检验。结果性格与整体（F=75.913，P<0.001）、生理（F=23.618，P<0.001）、心理（F=101.993，P<0.001）和社会亚健康（F=48.757，P<0.001）有独立相关关系。忍气吞声、焦虑易怒和急躁好胜型性格的健康得分均显著低于成熟稳重型性格（P<0.05）。性格与挫商和应激事件有关，与生理亚健康的关系主要通过挫商和应激事件的间接效应（β=-0.110）体现；与心理亚健康的关系均以直接效应（β=-0.172）为主，间接效应略次之（β=-0.126）；与社会亚健康的关系以间接效应（β=-0.113）为主，直接效应略次之（β=-0.082）。结论成熟稳重型性格可能有助于提高健康水平，忍气吞声、焦虑易怒和急躁好胜型性格可能会促进亚健康的发生，在成长过程中有意识培养成熟稳重性格对健康有积极的意义。

• 胰高血糖素样肽1受体激动剂对2型糖尿病合并超重/肥胖患者不同部位脂肪分布及肌肉含量的影响

  张雨丹,刘仕群,范存霞,曾艳梅,李际敏,谢翠华,薛耀明,关美萍

  目的探讨2型糖尿病（T2DM）合并超重/肥胖患者使用胰高血糖素样肽-1受体激动剂（GLP-1RAs）治疗对不同部位的脂肪分布及肌肉含量的影响。方法回顾性调查2014年12月~2015年9月于南方医科大学南方医院内分泌代谢科诊断为T2DM且体质量指数（BMI）≥24 kg/m2的76例患者，按BMI分为超重组（BMI 24~27.9 kg/m2）14例、肥胖组（BMI 28~31.9 kg/m2）35例及严重肥胖组（BMI≥32 kg/m2）27例，予GLP-1RA治疗3.0~29.0周（平均8.9周），比较各组治疗前后体质量、BMI、腰臀比、内脏脂肪指数、身体脂肪率及四肢肌肉率的变化。结果治疗前，各组的性别、年龄、身高、糖脂代谢指标、其他降糖药使用等均无显著统计学差异。治疗后，各组体质量均明显降低，但仅超重组和肥胖组差异有统计学意义（P<0.05）；各组BMI和内脏脂肪指数均较前明显降低（P<0.05）；超重组腰臀比较前明显降低（P<0.05）；肥胖组与严重肥胖组的身体脂肪率及各部位脂肪率均明显下降且肌肉率明显增加（P<0.05）。与超重组相比，肥胖组身体脂肪率和内脏脂肪指数下降更明显（P<0.05），肥胖组与严重肥胖组的肢体皮下脂肪率降低及肌肉率升高更明显（P<0.05）。结论GLP-1RAs可显著改善T2DM合并超重/肥胖患者各部位的脂肪沉积，且BMI指数越高的患者体质构成的改善越明显。

• 邻苯二甲酸二乙酯诱导的大鼠尿道下裂与Mafb的表达相关：基于转录组测序结果

  向涵,王绍,周玥,刘星,沈炼桔,龙春兰,张德迎,何大维,林涛,魏光辉

  目的通过转录组测序筛选大鼠尿道发育过程中相关差异基因，并进行验证；探究邻苯二甲酸二乙酯（DEHP）诱导SD大鼠尿道下裂的发生机制。方法40只成年SD孕鼠随机分成4组（n=10），前两组予以空白对照处理，分别于妊娠期16 d（GD16组）和GD19 d（GD19组）剖宫产取出雄性胎鼠，将收集好的胎鼠阴茎组织进行转录组测序，lllumina HiSeq 2000筛选出差异表达基因（DEGs），然后对DEGs进行差异基因功能（GO）和pathway显著富集性分析；选取其中的DEG（Mafb）进行免疫荧光验证。后两组分别予以玉米油（对照组）和DEHP [750 mg/(kg·d)]（DEHP暴露组）于GD12 d至GD19 d每日灌胃处理，GD19 d剖宫产取出雄性胎鼠，并判断有无尿道下裂的发生。扫描电镜和HE染色观察阴茎组织形态学改变，免疫荧光和Western blot检验阴茎组织中Mafb、β-catenin的表达水平。结果GD19组胎鼠阴茎组织与GD16组胎鼠阴茎组织转录组测序结果示1360个DEGs（其中上调797个，下调563个），差异基因主要富集于细胞粘着斑信号通路、轴突导向信号通路、细胞外基质受体作用信号通路等，选取DEG（Mafb）进行免疫荧光验证，发现Mafb的表达随发育显著增加，与测序结果相符。而DEHP暴露组胎鼠阴茎组织与对照组胎鼠阴茎组织相比，Mafb、β-catenin表达水平显著下调（P<0.01）。结论随着大鼠阴茎组织的正常发育，Mafb的表达逐渐增加；而DEHP暴露组较对照组Mafb、β-catenin表达显著下调，提示β-catenin信号通路影响Mafb表达可能与DEHP诱导大鼠尿道下裂发生相关。

• Exendin-4通过激活Nrf2/HO-1通路减轻糖尿病小鼠的肝脏氧化应激及纤维化

  方舒,蔡迎迎,李萍,吴春艳,邹少洲,张雨丹,林晓纯,关美萍

  目的探讨Exendin-4对链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病小鼠肝脏脂质代谢、氧化应激以及纤维化的作用以及其潜在的机制。方法将C57BL/6J小鼠随机分为对照组和糖尿病组（DM）。糖尿病组小鼠给予高脂饮食4周联合STZ造模，对照组小鼠普通饮食。DM小鼠造模成功后，再随机分为糖尿病对照组（DM-con）和糖尿病干预组（DM+E4）。DM+E4组小鼠给予Exendin-4每天1 nmol/kg体重，腹腔注射1次，共8周。监测体重、随机血糖，分析各组小鼠血脂水平，RT-PCR检测肝脏脂质代谢、纤维化和氧化应激指标，HE、天狼猩红以及油红O染色观察肝脏结构变化，Western blot检测肝脏TGF-β1、Nrf2以及HO-1的表达。结果DM组小鼠的血糖和体重较对照组明显升高（P<0.001），肝脏脂质沉积、纤维化以及氧化应激较对照组也显著增加，给予Exendin-4干预未显著改善肝脏的脂质沉积，但是Exendin-4治疗后糖尿病组小鼠血糖及TG明显降低（P<0.05），肝脏纤维化指标TGF-β、α-SMA及Col-I显著降低（P<0.05），抗氧化指标Nrf2、HO-1及GPX4显著升高（P<0.01）同时Nrf2和HO-1的蛋白表达水平也显著升高（P<0.01）。结论Exendin-4在肝脏脂质沉积未明显减轻的情况下通过激活Nrf2/HO-1信号通路显著改善糖尿病小鼠的肝脏纤维化及氧化应激。

• Connexin 43在急性冠脉综合征患者外周血单核细胞中的表达

  朱建,杨燕,胡司淦,李辉,张恒

  目的研究急性冠脉综合征（ACS）患者外周血单核细胞（PBMCs）上缝隙连接蛋白（Cx）43的表达变化及意义。方法选取2018年1月~2018年6月期间入住我科的初诊ACS患者40例，其中不稳定型心绞痛（UAP）患者20例，急性心肌梗死（AMI）患者20例，选取20例同期健康体检者作为对照组。采集所有受试者外周静脉血，分别提取血浆和单核细胞，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）和免疫比浊法（TIIA）检测血浆中白细胞介素（IL）-1β和高敏C-反应蛋白（hs-CRP）含量，运用荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot法检测PBMCs中Cx43 mRNA和蛋白的表达水平。结果与对照组相比，UAP组患者外周血浆中IL-1β及hs-CRP的含量均有明显升高（P<0.001），PBMCs中Cx43 mRNA和蛋白的表达量也显著增高（P<0.001）；AMI组患者外周血浆中IL-1β及hs-CRP的含量较UAP组进一步升高（P<0.001及P<0.01）；而AMI组患者PBMCs中Cx43 mRNA和蛋白的表达量却较UAP组和对照组均有明显降低（P<0.05）。结论UAP和AMI患者体内存在不同程度的炎症激活，且Cx43 在两者PBMCs中的表达量呈现相反的表达变化，提示Cx43可能在ACS不同类型发病中起到不同效应。

• G9a在乳腺癌中的表达及其对乳腺癌细胞增殖的影响

  赵子超,刘奇伦,伍春梅,郭文静,李金平

  目的探讨G9a在人乳腺癌中表达情况和分析其与乳腺癌临床病理学特征的关系及其对乳腺癌细胞增殖的影响。方法收集2016年10月~2017年10月期间行手术治疗且临床资料齐全的122例乳腺癌组织及与之相对应的癌旁正常组织标本61例，均提取于宁夏医科大学总医院生物样本组织库。利用免疫组化（IHC）和实时荧光定量PCR方法检测G9a在乳腺癌组织中的表达情况；分析G9a与乳腺癌临床病理特征的关系；分析G9a与乳腺癌分子分型、免疫组化指标之间的关系；利用生物信息学方法分析G9a在乳腺中的表达及对预后的影响；应用G9a抑制剂UNC0631检测G9a对乳腺癌细胞增殖的影响。结果（1）结合IHC、实时荧光定量PCR及生信方法，发现G9a在人乳腺癌组织中呈高表达；（2）分析G9a与乳腺癌临床病理特征的关系中发现G9a在乳腺浸润性导管癌组织中呈高表达，G9a的表达与乳腺癌患者的年龄呈负相关（均P<0.05）；（3）分析G9a与乳腺癌分子分型、免疫组化指标的关系中，发现G9a在Her-2过表达型乳腺癌中呈高表达，G9a的表达与Her-2、Ki-67及E-cadherin的表达呈正相关（均P<0.05）；（4）利用生信分析G9a与乳腺癌预后关系中发现G9a可作为乳腺癌预后不良的独立风险因素；（5）在应用G9a抑制剂的实验中发现G9a抑制剂可抑制乳腺癌细胞的增殖。结论乳腺癌组织中G9a呈高表达，且促进乳腺癌的发生发展，可作为乳腺癌预后不良的独立风险因素，可为乳腺癌的早期诊断和治疗提供新的方向。

• 外泌体介导多发性骨髓瘤细胞对硼替佐米的耐药

  唐举贤,陈琪,张凤,张文君,段思蓉,肖端

  目的探索由外泌体介导的多发性骨髓瘤细胞对硼替佐米(Btz)耐药的作用机制。方法在首次确诊骨髓瘤的患者中，针对Btz耐受的类型采集外周血，行超速离心法分离血清中的外泌体，并用电镜技术、NTA法以及WB技术鉴定。用不同浓度的Btz预处理骨髓瘤细胞，选择合适的药物浓度，再用不同浓度外泌体处理骨髓瘤细胞，通过MTS法检测经外泌体处理的瘤细胞对Btz的敏感程度。搜索外泌体数据库exocarta，运用STRING绘制网络图和蛋白互作表格。结果外周血中分离出的囊泡主要分布在200 nm以下，颗粒均值153 nm，众数140.1 nm。WB检测外泌体标志蛋白CD63、Tsg101和Alix表达，外泌体表达呈阳性。经外泌体预处理的骨髓瘤细胞对Btz的敏感度下降。在相同浓度Btz预处理条件下，随着外泌体处理时间、浓度的增加，骨髓瘤细胞耐药能力愈强。数据库搜索到人血清外泌体蛋白ABCB1、ABCB4、PDCD6IP、EGFR等，其中EGFR为网络节点。结论一定浓度的外泌体可作为信号载体介导多发性骨髓瘤细胞对Btz的耐药。EGFR可能是引起外泌体促进骨髓瘤细胞Btz耐药的关键蛋白。

• 274例睾丸扭转的临床特征及误诊分析

  李旭睿,高云亮,尹焯,杨金瑞

  目的讨论睾丸扭转的临床特点，探究导致误诊及睾丸损毁的相关因素、辅助检查的参考价值、发病率与气温的关系，起病后白细胞的变化水平，为及时明确诊断及处理睾丸扭转提供临床思路。方法回顾性分析2009年5月1日~2018年11月1日湖南地区9家医院诊断为睾丸扭转的274例患者的临床资料，比较首诊医院为三甲医院及非三甲医院的误诊率及睾丸损毁率差异，分析发病时温度、起病后血WBC值，总结关于睾丸扭转发病和诊疗的影响因素。结果共274例病例纳入本研究，按照首诊医院等级分为两组，两组间病人一般资料无明显差异。其中首诊医院为三甲医院者59例，误诊率30.5%，睾丸损毁率57.6%；而在非三甲医院首诊的215例患者中误诊率达到61.9%，睾丸损毁率85.6%。两组患者的误诊率、睾丸损毁率比较，差异有统计学意义（P<0.05）。睾丸扭转好发于气温较低的冬季和春季。起病后2~4 d时血WBC值高于正常水平。结论首次就诊于三甲医院患者的误诊率低于非三甲医院患者，保留睾丸的概率也高于非三甲医院。应加大力度在人群中普及关于睾丸扭转的医学知识，并加强基层医师诊断能力和手术水平。

• 医学生物质主义价值观和抑郁：生命意义感的中介作用

  汤思尧,肖蓉,张瑞雪

  目的探讨医学生物质主义价值观、抑郁和生命意义感之间的关系。方法采用物质主义倾向量表（MTS）、简版生活目的量表（PIL-SF）、患者健康问卷-9（PHQ-9）对某医科大学1158名医学生进行调查。结果17.33%的医学生有明显抑郁症状；医学生物质主义与生命意义感之间呈显著负相关（r=-0.229，P<0.01），生命意义感与抑郁之间呈显著负相关（r=-0.476，P<0.01），物质主义与抑郁之间呈显著正相关（r=0.246，P<0.01）；生命意义感在物质主义和抑郁之间起部分中介作用，中介效应占总效应比例为41.2%。结论物质主义价值观可直接影响医学生的抑郁水平，也可通过生命意义感的中介作用间接影响其抑郁水平。

• 超声乳化术中较低累计能量复合参数有助于2型糖尿病白内障患者的治疗

  翟建伟,苏伟,唐作翼,陆兰芬,黄晓棠,韦柳丹

  目的探讨超声乳化术中不同累计能量复合参数对2型糖尿病白内障患者的临床意义。方法选取我院2017年1月~2018年9月收治的2型糖尿病白内障患者252例（252眼），根据不同的累计能量复合参数，分为A、B两组，A组150例（150眼），累计能量复合参数为8；B组102例（102眼），累计能量复合参数为10，同时将无2型糖尿病白内障患者90例（90眼）作为对照组，累计超声能量参数为10。3组患者均接受白内障超声乳化术治疗，分析黄斑厚度及最佳矫正视力、视力、术后渗漏发生情况，包括术前、术后1周、术后1月、术后3月等阶段。结果3组在进行超声乳化术前后的各指标差异有统计学意义（P<0.05），术后视力明显好于术前。术后3月A组视力<0.1、≥1.0的比例、黄斑厚度、最佳矫正视力、渗透率与B组差异有统计学意义（P<0.05），而与对照组差异无统计学意义（P>0.05）。术后1月、3月，A组与对照组的视力无差异，A组视力<0.1的比例小于B组（P<0.05），视力≥1.0的比例大于B组（P<0.05）。术后1月，A组总渗漏率31.1%高于对照组21.1%，与B组无显著差异，但A组的弥漫性渗漏11.7%高于对照组的2.2%（P<0.05）；术后3月,A组的总渗漏率10%小于B组的32.4%（P<0.05），主要是弥漫性渗漏与局部渗漏的差异。结论超声乳化术可有效改善白内障患者的视力，并对非糖尿病白内障患者效果明显，同时较低的累计能量复合参数有助于2型糖尿病白内障患者的治疗。黄斑厚度、局部性渗透和弥漫性渗透可作为超声乳化术后视力恢复、稳定的参考。