南方医科大学学报

作者：邓小垭,罗勤利,董飞,徐莉,唐小葵

目的研究RNA结合蛋白tristetraprolin在肺腺癌中的表达及抑制自噬作用的分子机制。方法瞬时转染tristetraprolin过表达质粒，分别在转染tristetraprolin 24、48 及72 h 后采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）和Western blot 检测肺腺癌细胞中tristetraprolin表达及自噬相关分子Beclin1、LC3II/LCI及p62的表达变化。瞬时转染tristetraprolin过表达质粒及加入TNF-α，将肺腺癌细胞分为空载组、tristetraprolin 组、空载+TNF-α组及tristetraprolin+TNF-α组，应用免疫荧光和Western blot检测NF-ĸBp65、c-rel、p50分子在细胞核中表达情况。共转染tristetraprolin过表达质粒及IκBα-mut质粒，将肺腺癌细胞分为tristetraprolin空载组、IκBα-mut 空载组、tristetraprolin 组、IκBα-mut 组及tristetraprolin+IκBα-mut 组，采用RT-qPCR 和Western blot 检测tristetraprolin表达及自噬相关基因表达变化。结果Tristetraprolin在肺腺癌细胞中RNA及蛋白水平表达低（P<0.001）。过表达tristetraprolin 后，自噬相关基因Beclin1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ在RNA及蛋白水平表达均较空载组降低（P<0.001）。同时，过表达tristetraprolin后，细胞核内的p65及c-rel蛋白表达较空载组及空载+TNF-α组减少（P<0.05），但p50表达无明显变化（P>0.05）。过表达tristetraprolin后，p65及c-rel核移位较空载组减少。共转染IκBα突变质粒及tristetraprolin过表达质粒后，NF-κB信号通路被阻断，自噬相关基因Beclin1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ在RNA及蛋白水平表达较tristetraprolin过表达组升高（P<0.05），NF-ĸB信号通路被阻断后tristetraprolin对自噬的抑制作用减弱。结论Tristetraprolin在肺腺癌细胞中低表达，过表达tristetraprolin可能通过抑制NF-ĸB p65及c-rel核移位而抑制肺腺癌细胞自噬。

来源：2019年第03期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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