南方医科大学学报

作者：白志勋,陆静,杨亦彬

目的通过体外特异阻断试验，探讨转化生长因子-β1/整合素连接激酶/成纤维细胞特异蛋白1（TGF-β1/ILK/FSP1）信号通路在环孢素A致肾小管上皮细胞转分化中的作用。方法构建并鉴定ILK-RNAi慢病毒表达载体ILKshRNA。将NRK52E细胞培养分为5组，分别为空白对照组；环孢素诱导组：细胞培养液加环孢素A1 mg/L；TGF-β1干预组：阻断剂（SB431542）10 μmol/L加环孢素A1 mg/L；ILK干预组：阳性转染ILKshRNA后加入环孢素A1 mg/L；阴性对照组：阴性转染ILKshRNA后加入环孢素A1 mg/L。实时荧光定量PCR检测TGF-β1、ILK和FSP-1 mRNA的表达，Western blot检测TGF-β1、ILK、FSP-1的蛋白表达。免疫组化检测细胞爬片α-SMA阳性表达细胞数。结果与空白对照组比较，环孢素诱导组细胞TGF-β1、ILK、FSP-1基因及蛋白表达量均显著增加（P<0.05）；TGF-β1 干预组经SB431542 处理后，TGF-β1、ILK 和FSP1 水平较环孢素诱导组降低（P<0.05）；经ILKshRNA沉默后，ILK和FSP1水平较环孢素诱导组降低（P<0.05）。α-SMA阳性细胞数经SB431542和ILKshRNA处理后较环孢素诱导组降低（P<0.05）。结论TGF-β1/ILK/FSP1信号通路激活是环孢素A诱导大鼠肾小管上皮细胞转分化的重要机制之一，ILK参与环孢素A诱导大鼠肾小管上皮细胞间充质转分化过程。

来源：2019年第07期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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