南方医科大学学报

作者：包鹏举, 孙 瑶, 王海华, 金孝岠, 张根葆

关键词：胶束毛细管电泳,白介素-12,二硫键,

目的 建立胶束毛细管电泳法鉴定白介素-12（IL-12）、检测其含量并分析IL-12去折叠的过程。方法 以50 ?m i.d.×48.5 cm未涂层毛细管为色谱分离柱，分析影响IL-12分离效果的因素并建立IL-12标准曲线；将IL-12与抗IL-12抗体混匀液在38 ℃水浴槽中孵育，40 min后在相同条件下进行毛细管电泳，将其与IL-12、抗IL-12抗体的电泳结果比较以鉴定IL-12；将IL-12与DTT在60 ℃水浴槽中孵育不同时间，并研究IL-12在不同状态下的电泳结果分析IL-12去折叠的过程。结果 建立了以含30 mmol/L十二烷基硫酸钠（SDS）的硼酸盐（pH=9.3，80 mmol/L）为缓冲液的胶束毛细管电泳在线扫集法；IL-12的峰面积与质量浓度具有良好的线性关系，线性相关系数为0.9991，线性范围为2~120 ng/L；随着IL-12与DTT孵育时间的延长，IL-12的二硫键逐渐被打开，图谱中可显示蛋白峰随之发生的变化。结论 毛细管电泳法操作简单、灵敏度高，这为今后在肿瘤等疾病中快速检测IL-12的含量以及分析其含量变化的原因提供理论依据。

来源：2020年第09期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

查看南方医科大学学报杂志2020年第09期