南方医科大学学报

作者：姚 越, 张 冲, 韩 兵, 汤玉锐, 熊言骏, 汪 盛

关键词：睾丸癌,精原细胞瘤,紫草素,糖酵解,死亡形式,

目的 探究紫草素对睾丸癌细胞I-10和精原细胞瘤TCAM-2死亡形式的影响，并从线粒体功能和糖酵解方面探讨其可能机制。方法 I-10细胞组加入浓度分别为0 μmol/L（对照组）、1.2、1.4、1.6 μmol/L的紫草素，TCAM-2细胞组加入浓度分别为0 μmol/L（对照组）、0.5、1、1.5 μmol/L的紫草素，JC-1试剂盒和ROS试剂盒分别用来检测线粒体膜电位和活性氧的变化；乳酸试剂盒检测胞内乳酸变化；MTT法检测细胞增殖抑制；透射电镜观察细胞死亡形式；Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡；Western blot法检测线粒体通路相关凋亡蛋白Bax、Bcl-2、cleaved caspase 3和自噬相关蛋白LC3B以及糖酵解相关蛋白PKM2、GLUT1、HK2的相对表达水平。结果 MTT结果表明，紫草素能够随时间和剂量依赖性的抑制I-10和TCAM-2细胞的增殖（P<0.05），I-10组24、48、72 h的IC50值分别为1.8、1.36和1.16 μmol/L，TCAM-2组24、48、72 h的IC50值分别为2.37、0.8和0.41 μmol/ L；紫草素能通过下调I-10和TCAM-2细胞线粒体膜电位和增加细胞活性氧水平而影响其线粒体功能（P<0.05），抑制乳酸水平影响细胞糖酵解能力（P<0.05）；透射电镜和Annexin V-FITC/PI双染法检测出紫草素能够诱导I-10和TCAM-2细胞凋亡和过度自噬现象（P<0.05）；Western blot证明，紫草素可以通过下调线粒体通路相关凋亡蛋白Bax、Bcl-2、cleaved caspase 3的表达而影响I-10和TCAM-2细胞线粒体功能，下调PKM2、GLUT1、HK2影响其糖酵功能，通过上调LC3B增加细胞自噬（P<0.05）。结论 紫草素对睾丸癌细胞I-10和TCAM-2具有增殖抑制及诱导凋亡和增加自噬作用，其机制可能为紫草素影响I-10和TCAM-2细胞能量代谢功能。

来源：2020年第09期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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