南方医科大学学报

作者：张明洋, 王 静, 李敏超

关键词：支气管哮喘,白细胞介素-13,薄荷醇,黏液蛋白5AC,抗凋亡蛋白,瞬时受体电位melastatin 8 ,

目的 研究白细胞介素-13（IL-13）联合薄荷醇对人支气管上皮细胞（16HBE）黏液蛋白（MUC）5AC合成及分泌的影响，并探索瞬时受体电位通道（TRP）melastatin 8（TRPM8）和抗凋亡因子B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）在此环节中所起的作用。方法 将16HBE细胞分为：对照组、IL-13组（培养基加入终浓度10 ng/mL的IL-13连续刺激）、薄荷醇组（于第6天加入1 mmol/L薄荷醇刺激）、IL-13+薄荷醇组（IL-13连续刺激6 d后加入1 mmol/L薄荷醇刺激），观察各组MUC5AC表达量、胞内Ca2+浓度和Bcl-2表达；予以Bcl-2抑制剂ABT-263、TRPM8离子通道特异性抑制剂BCTC干预，观察两者对各组MUC5AC的影响及BCTC对胞内Ca2+浓度、Bcl-2表达的影响。CCK-8法检测细胞活力，流式细胞术检测各组细胞内Ca2+荧光强度，实时荧光定量PCR检测MUC5AC及Bcl-2mRNA水平，酶联免疫吸附法检测培养液中MUC5AC含量。结果 IL-13组、薄荷醇组、IL-13+薄荷醇组MUC5AC mRNA和蛋白的表达均明显高于对照组（P<0.05），且IL-13+薄荷醇组最高并于24 h达到最高峰（P<0.01）；薄荷醇组、IL-13组、IL-13+薄荷醇组胞内Ca2+荧光强度、Bcl-2mRNA表达均明显高于对照组（P<0.05），且IL-13+薄荷醇组最高（P<0.01）；予以BCTC干预后，薄荷醇组、IL-13+薄荷醇组胞内Ca2+荧光强度、Bcl-2mRNA、MUC5AC mRNA和蛋白表达水平均显著低于相应的未干预组（P<0.05），而IL-13组未发生明显变化（P>0.05）；予以ABT-263干预后，各ABT-263干预组MUC5ACmRNA和蛋白表达水平均显著低于相应的未干预组（P<0.05）。结论 IL-13联合薄荷醇对于16HBE细胞MUC5AC的合成及分泌产生协同效应，其机制可能与TRPM8受体诱导的Bcl-2协同性增强有关。

来源：2020年第10期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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