南方医科大学学报

作者：王莉洁, 韩 曦, 郑 霞, 周园园, 侯惠莲, 陈 葳, 李 旭, 赵 乐

关键词：卵巢癌；人参皂苷；VHL；甲基化,

目的 明确人参皂苷20(S)-Rg3促进卵巢癌细胞抑癌基因von Hippel-Lindau（VHL）表达的机制。方法 Real-time PCR和Western blotting检测20(S)-Rg3处理前后卵巢癌细胞SKOV3中的VHL、DNA甲基转移酶DNMT1、DNMT3A和DNMT3B的mRNA和蛋白水平。Real-time PCR检测甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2-脱氧胞苷（5-Aza-CdR）处理卵巢癌细胞SKOV3前后VHL的mRNA水平变化。甲基化特异性PCR（MSP）检测20(S)-Rg3单纯处理组和20(S)-Rg3处理且过表达DNMT3A组的VHL基因启动子区的甲基化水平，并检测VHL的mRNA和蛋白表达水平。免疫组化检测课题组前期获得的20(S)-Rg3处理组及对照组的裸鼠皮下移植瘤组织中VHL和DNMT3A的蛋白表达。结果 20(S)-Rg3处理后，卵巢癌细胞SKOV3中VHL的mRNA水平升高到阴性对照细胞的2倍以上，蛋白水平亦上调（P<0.05）；DNMT3A的mRNA水平和蛋白水平均下降（P<0.05），DNMT3B的mRNA水平略有升高但蛋白水平无明显变化（P>0.05），DNMT1的mRNA和蛋白水平均无变化（P>0.05）。2 μmol/L和5 μmol/L的5-Aza-CdR处理后，SKOV3细胞的VHL mRNA水平升高到阴性对照细胞的3倍以上（P<0.05）。20(S)-Rg3使VHL基因启动子区的甲基化水平降低（P<0.05），在20(S)-Rg3处理的同时过表达DNMT3A，则VHL基因启动子甲基化水平再次升高，同时VHL mRNA和蛋白水平均降低（P<0.05）。免疫组织显示，相对于对照组，20(S)-Rg处理组的裸鼠皮下移植瘤组织中VHL的表达上调、DNMT3A的表达下调。结论 20(S)-Rg3通过抑制DNMT3A介导的启动子甲基化而促进卵巢癌细胞中VHL的表达。

来源：2021年第1期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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