国内刊号:44-1627/R
国际刊号:1673-4254
发布日期:
作者:唐振宁, 丁小云, 秦少杰, 张朝林
关键词:甲状腺癌;CTHRC1;增殖;凋亡;siRNA干扰,
目的 探讨胶原三股螺旋重复蛋白1(CTHRC1)甲状腺乳头状癌TPC-1细胞增殖、凋亡的影响。方法 成功筛选干扰甲状腺乳头状癌TPC-1细胞CTHRC1表达的siRNA,以脂质体转染法将siRNA转染甲状腺乳头状癌TPC-1细胞,采用real-time PCR和Western blot检测转染后TCP-1细胞中CTHRC1mRNA和蛋白表达的变化。实验分组:将筛选的干扰序列转染TPC-1细胞作为干扰组(si-CTHRC1组),将随机阴性对照序列转染的TPC-1细胞作为阴性对照组(si-NC组),以不做任何处理TPC-1细胞为空白组(WT组)。采用CCK-8实验检测细胞增殖;流式细胞术AV/PI双染观察各组TCP-1细胞凋亡的变化;采用Western blot法检测各组 TPC-1 细胞中含剪切型半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(c-Caspase-3)蛋白、剪切型多聚 ADP 核糖聚合酶 1 (c-PARP1)蛋白表达水平以及磷酸化细胞外信号调节激酶 1/2(ERK1/2)表达水平。结果 将筛选出明显抑制 TPC-1 细胞CTHCR1表达的siRNA转染细胞后,TPC-1细胞中CTHRC1 的mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05)。与WT组和si-NC组相比,si-CTHRC1组的细胞活降低(P<0.05);与对照组相比,si-CTHRC1组的TPC-1细胞细胞凋亡率升高,Western blot实验发现:si-CTHRC1组的c-caspase-3、c-PARP1蛋白表达水平均升高(P<0.05);si-CTHRC1组ERK1/2蛋白的磷酸化水平增加。结论 干扰CTHRC1能够抑制TPC-1细胞的增殖并诱导凋亡,此过程可能通过激活ERK1/2信号通路介导。
来源:2021年第4期
《南方医科大学学报》期刊编辑部