南方医科大学学报

作者：鲍丙溪, 刘 健, 万 磊, 张 颖, 龙 琰, 孙广瀚

关键词：骨关节炎；新风胶囊；miR-23a-3p；PTEN/PI3K/AKT/mTOR；免疫炎症反应,

目的 观察新风胶囊（XFC）含药血清通过调控miR-23a-3p /PTEN/PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制骨关节炎（OA）CD4+T与软骨细胞共培养中免疫炎症反应的作用机制。方法 选取30例OA患者（OA组）及30例正常人（NC组）检测miR-23a-3p、10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因（PTEN）、磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B（AKT）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）的表达，观察临床指标：红细胞沉降率（ESR）、超敏C反应蛋白（hs-CRP）、IgA、IgG、IgM、补体 C3、补体C4的表达，并观察通路与临床指标的相关性。观察 30 例 OA 患者经 XFC 治疗后通路及临床指标的变化。分离及提取 OA-CD4 +T 细胞，transwell小室培养OA-CD4+T细胞与OA-CH，SD大鼠给药灌胃制备XFC含药血清；采用CCK8法检测OA-软骨细胞的细胞增殖；双荧光素酶报告实验分析miR-23a-3p和PTEN的靶向关系；RT-PCR技术检测共培养细胞中miR-23a-3p、PTENmRNA、PI3KmRNA、AKTmRNA、mTORmRNA 的表达；采用 ELISA 法检测 IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α的水平；Western blotting 检测PTEN、PI3K、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR蛋白表达。结果 与NC组相比，OA组miR-23a-3p、PTEN、PI3K、AKT、IL-1β、IL-6、TNF-α表达显著上调，而PTEN、IL-10表达显著下调（P<0.01）；相关性分析表明：miR-23a-3p与IL-6呈正相关（P<0.01），PI3K与IL-10呈正相关，mTOR与IL-6、IL-10、补体C3、补体C4呈正相关（P<0.01或P<0.05）；加入XFC含药血清，miR-23a-3p及PI3K/AKT/mTOR通路被抑制，L-1β、IL-6、TNF-α表达水平下降、IL-10表达水平升高（P<0.01）；Model组miR-23a-3p、PI3K、AKT、mTOR、IL-1β、IL-6和TNF-α表达水平升高，PTEN、IL-10表达水平降低（P<0.01）；miR-23a-3p经过表达后，miR-23a-3p、PI3K、AKT、mTOR、IL-1β、IL-6和TNF-α表达水平显著升高，PTEN、IL-10表达水平显著降低（P<0.01或P<0.05）；XFC组IL-1β、IL-6、TNF-α表达降低，IL-10表达升高，miR-23a-3p、PI3K、AKT、mTOR表达下调，PTEN表达上调（P<0.01或P<0.05）。结论 XFC可通过下调miR-23a-3p的表达，抑制PTEN/PI3K/AKT/mTOR通路的活化，改善IL-1β、IL-6，IL-10和TNF-α的表达，降低OA患者炎症反应。

来源：2021年第4期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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