南方医科大学学报

作者：朱晨露, 杜家如, 姚言雪, 武丹丹, 苑 敏, 干 露, 童旭辉

关键词：顺铂；ATG5；ATG7；自噬；耐顺铂睾丸癌细胞,

目的 观察顺铂作用后，耐顺铂睾丸癌I-10/DDP细胞自噬水平的变化；探讨沉默ATG5、ATG7对顺铂作用后的自噬及细胞增殖的影响。方法 顺铂（15 μmol/L，12 h）作用I-10/DDP细胞后，免疫印迹法检测LC3、p62的表达水平；透射电子显微镜和mCherry-GFP-LC3B双标法检测自噬水平。实验分为转染试剂对照组（Mork组）、阴性对照质粒组（NC组）、转染shRNA-ATG5质粒组（shRNA-ATG5组）、转染shRNA-ATG7质粒组（shRNA-ATG7组），免疫印迹法检测ATG5、ATG7的表达。顺铂（15 μmol/L，12 h）作用转染组细胞后，免疫印迹法检测LC3、p62的表达；透射电子显微镜、mCherry-GFP-LC3B双标法检测自噬水平；MTT法检测细胞存活率；集落克隆实验检测细胞增殖情况。结果 顺铂处理后，I-10/DDP细胞中LC3Ⅱ的表达水平明显增加（P=0.001），p62的表达水平降低（P=0.01），自噬体数量增加。与NC组相比，shRNA-ATG5组、shRNA-ATG5组中ATG5、ATG7的表达量明显降低（P=0.005，P<0.001）。与单用顺铂组相比，shRNA-ATG5组与shRNA-ATG7组细胞用顺铂处理后LC3Ⅱ表达水平明显降低（P<0.001），p62的表达水平明显增加（P<0.001），自噬体数量减少、细胞存活率（P<0.001）及克隆形成能力均降低。结论 沉默ATG5、ATG7后抑制顺铂介导的自噬，增强顺铂抑制细胞增殖的作用。

来源：2021年第5期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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