南方医科大学学报

作者：赵茴茴, 古文清, 潘文斌, 张汉彬, 帅 领, 刁瑞英, 汪丽萍

关键词：卵巢功能不全；顺铂；卵巢损伤；miR-483-5p；FKBP4,

目的 探讨FKBP4蛋白在顺铂诱导的早发性卵巢功能不全（POI）中的作用及其机制研究。方法 采用ITRAQ技术测定4对顺铂诱导的小鼠POI模型组及生理盐水对照组卵巢组织的差异蛋白。使用TargetScan软件进行靶点预测，利用qRT-PCR和Western blot方法确定顺铂诱导组及生理盐水对照组miR-483-5p及FKBP4的表达水平。收集POI患者及正常患者血清各 6 例，并利用 qRT-PCR 检测 miR-483-5p 表达水平。利用细胞转染及双荧光素酶实验验证 miR-483-5p 和 FKBP4 的关系。利用转染和/或顺铂分别处理原代颗粒细胞及KGN细胞系（人颗粒细胞系），将细胞分为对照（NC）组、miR-483-5p组、miR-483-5p+顺铂处理组和miR-483-5p+FKBP4+顺铂处理组。以此验证miR-483-5p、FKBP4在顺铂处理的颗粒细胞中的作用；利用 Cre-loxp 系统构建卵母细胞特异性过表达 miR-483-5p 及同窝未过表达的转基因小鼠，用免疫荧光、原位杂交及ELISA检测卵巢功能。结果 与生理盐水组相比，顺铂诱导的POI小鼠的卵巢中FKBP4表达下降（P<0.05）。靶点预测软件发现miR-483-5p的潜在靶点是FKBP4，并且较生理盐水对照组，它在顺铂诱导的POI小鼠的卵巢、血清以及POI患者的血清中均高水平表达（P<0.01）。体外实验进一步证实FKBP4是miR-483-5p的作用靶点。人颗粒细胞系及小鼠原代颗粒细胞过表达FKBP4缓解了顺铂联合miR-483-5p过表达引起的细胞凋亡（n=5，P<0.05）。与同窝未过表达的小鼠比较，卵母细胞过表达miR-483-5p的小鼠顺铂诱导造成的卵巢损伤更严重。结论 miR-483-5p/FKBP4在顺铂诱导的POI中发挥作用。顺铂诱导的卵巢损伤过程可能与上调的miR-483-5p靶向作用FKBP4，导致的FKBP4表达下降有关。miR-483-5p上调可能增加卵巢对顺铂药物的敏感性，使卵巢功能降低。检测血清miR-483-5p可以用来预测POI的发生和发展。

来源：2021年第6期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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