南方医科大学学报

作者：梅 伟, 洪博文, 黄桂成

单位：南京中医药大学附属医院骨伤科，江苏 南京 210000

关键词：膝骨关节炎；滑膜成纤维细胞；焦亡；高迁移率族蛋白1,

目的 研究膝骨关节炎病理进程中滑膜成纤维细胞（FLSs）焦亡与其释放高迁移率族蛋白1（HMGB1）的分子机制。方法在动物实验中，将SD大鼠利用随机数字表法分为2 组，6只/组，空白对照组（无任何处理），膝骨关节炎组（膝骨关节炎模型），使用前交叉韧带切断法（ACLT）建立大鼠膝骨关节炎模型，通过HE染色及Mankin'评分观察大鼠膝关节软骨的破坏情况，通过蛋白免疫印迹法检测膝关节滑膜组织中细胞焦亡相关的蛋白和HMGB1蛋白的表达情况。在细胞实验中，将细胞随机分为3组，空白对照组（等量的PBS处理），细胞焦亡组（LPS+ATP处理），小干扰RNA转染组（LPS+ATP+siRNA处理）。使用脂多糖+三磷酸腺苷（LPS+ATP）诱导滑膜成纤维细胞发生焦亡，分别使用不同的小干扰RNA抑制滑膜成纤维细胞发生焦亡，使用RT-qPCR验证不同的小干扰RNA抑制NLRP1、NLRP3 、ASC和caspase-1的转染效果，通过Western blot检测滑膜成纤维细胞中细胞焦亡相关的蛋白和HMGB1蛋白的表达情况；使用ELISA检测细胞上清中HMGB1的蛋白水平。结果 动物实验中，与空白对照组相比，膝骨关节炎组滑膜组织中焦亡相关的蛋白及HMGB1蛋白表达明显升高（P<0.05），软骨组织Mankin'评分明显升高（P<0.05）；细胞实验中，小干扰RNA能够明显抑制NLRP1、NLRP3、ASC和caspase-1的mRNA表达（P<0.05），细胞焦亡组中细胞焦亡相关的蛋白及HMGB1蛋白表达明显高于空白对照组和小干扰RNA转染组（P<0.05），各细胞焦亡组细胞上清中HMGB1的蛋白水平明显高于空白对照组和小干扰RNA转染组（P<0.05）。结论 在膝骨关节炎病理进程中，NLRPs炎性小体介导的滑膜成纤维细胞焦亡可促进HMGB1的大量释放，这与细胞焦亡下游因子caspase-1蛋白的活化有关。

来源：2021年第8期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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