南方医科大学学报

作者：陈 蕊, 张玉荣, 陈 鹏, 庞依心, 李宏宝, 陈子溦, 张小用, 张鸿毅, 李武军

单位：西安医学院第一附属医院，陕西 西安 710077；西安医学院基础医学部, 陕西 西安 710021；西安交通大学第二附属医院，陕西 西安 710004；西安交通大学基础医学部生理与病理生理学系，陕西 西安 710061；西安医学院临床医学院，陕西 西安 710021

关键词：7SK截短体；胚胎干细胞；增殖；周期蛋白依赖激酶9；细胞分裂周期蛋白6,

目的 探讨小核非编码RNA 7SK在胚胎干细胞（ESCs）增殖中的作用，为原始侏儒症疾病的早期诊治提供靶点。方法 利用CRISPR/Cas9系统转染ESCs，通过PCR产物测序和甘油梯度分析鉴定每个单克隆细胞系获得7SK 128-179 突变体。使用慢病毒系统敲除CDK9，然后通过Western blotting分析敲除效率和相关通路蛋白的变化。结果 CRISPR/Cas9系统转染后，ESCs中出现128-179 nt缺失突变的7SK，该突变导致ESCs增殖缺陷。7SK 128-179 nt突变的ESCs中LARP7和CDC6的蛋白水平显著下调，通过干预CDK9的活性发现7SK对ESCs增殖的调控作用依赖于CDK9的活性。结论 7SK 128-179 nt截短体可通过下调 CDC6 严重影响ESCs的增殖，且这一过程依赖于CDK9活性，提示7SK截短突变可作为侏儒症的早期筛查和治疗靶点。

来源：2021年第8期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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