南方医科大学学报

作者：胡雅琼, 梁 答, 陈新璐, 陈 琳, 白 俊, 李洪利, 尹崇高, 钟 伟

单位：潍坊医学院病理学教研室，附属医院关节外一科//矫形骨科，医学研究实验中心，护理学院，山东 潍坊 261053

关键词：miR-671-5p,SMAD3,迁移,侵袭,上皮间质转化,骨肉瘤,

目的 探讨miR-671-5p影响骨肉瘤的迁移侵袭的相关机制。方法 通过NCBI在线数据库筛选骨肉瘤中差异表达的微小RNA（miRNA）、预测miRNA的靶蛋白并进行功能分析；实时荧光定量PCR（qRT-PCR）用于检测转染过表达miR-671-5p质粒后con组和miR-671-5p组骨肉瘤细胞中miR-671-5p的表达情况；通过Transwell实验检测转染质粒后骨肉瘤细胞的迁移和侵袭能力；Western blot实验检测相关蛋白在骨肉瘤细胞中的表达情况；荧光素酶报告基因检测重组人SMAD家族成员3（SMAD3）的 3’UTR中是否含有miR-671-5p的结合位点。结果 MiR-671-5p在骨肉瘤组织和细胞中表达下调（P<0.05）。qRT-PCR证明转染过表达miR-671-5p质粒后，细胞转染成功（P<0.05）。过表达骨肉瘤细胞中的miR-671-5p后细胞的迁移和侵袭能力明显降低（P<0.05），并且miR-671-5p能够抑制骨肉瘤细胞的上皮间质转化（EMT）（P<0.05）；Western blot结果显示SMAD3在骨肉瘤细胞中表达上调（P<0.05）；荧光素酶报告基因检测证实miR-671-5p与SMAD3的3’UTR之间存在结合位点（P<0.05）；Western blot结果显示转染过表达SMAD3质粒后，SMAD3表达明显升高（P<0.05），而miR-671-5p能明显抑制SMAD3的表达（P< 0.05）；Transwell实验证明SMAD3能够促进骨肉瘤细胞的迁移和侵袭能力（P<0.05），而miR-671-5p则能够逆转这种促进作用（P<0.05）。结论 MiR-671-5p能够通过负向调控SMAD3抑制骨肉瘤细胞迁移和侵袭能力。

来源：2021年第10期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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