南方医科大学学报

作者：罗玉婷, 杨正艳, 李 蒙, 赵曼竹, 温秀杰, 周 智

单位：重庆医科大学附属口腔医院，重庆 401147；口腔疾病与生物医学重庆市重点实验室，重庆 401147；重庆市高校市级口腔生物医学工程重点实验室，重庆 401147；四川省泸州市西南医科大学附属口腔医院正畸科，四川 泸州 646000

关键词：p75NTR；Mage-D1；外胚间充质干细胞；成骨分化,

目的 检测Mage-D1与活化后p75NTR的结合及对外胚间充质干细胞（EMSCs）矿化的调控。方法 取孕19.5 d SD大鼠牙胚，组织贴壁法获取EMSCs，流式细胞术检测细胞表面抗原。设置实验分组：空白对照组（NC），100 ng/mL NGF刺激组（100 ng/mL NGF）、慢病毒干扰Mage-D1组（SH-Mage-D1）。邻位连接技术检测Mage-D1与经NGF活化后p75NTR结合的变化，并比较不同分组间的结合强度差异。茜素红与ALP染色观察染色，RT-PCR与Western blot检测ALP、Runx2、OCN、BSP、OPN、Col1、Msx1及Dlx1的表达水平。结果 组织块贴壁法获得孕19.5 dEMSCs，流式细胞术检测细胞表面抗原结果为CD44、CD90、CD29、CD146，CD105高表达，CD45低表达；邻位连接法检测Mage-D1与经NGF活化后p75NTR的结合随着时间的延长而增多，且实验组与对照组相比结合强度差异具有统计学意义（P<0.05）；茜素红与ALP染色结果显示矿化结节与碱性磷酸酶与强度变化一致；RT-PCR与Western blot检测ALP、Runx2、OCN、BSP、OPN、Col1、Msx1及Dlx1在100 ng/mL NGF组最高（P<0.05）。结论 Mage-D1在外胚层间充质细胞中可与经NGF活化后的p75NTR直接结合，且二者的结合对EMSCs的矿化有正向调节作用。

来源：2021年第10期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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