南方医科大学学报

作者：吴 宁, 袁桃花, 姬进忠, 程 瑶, 李明义, 梁 玺, 孙见飞, 刘 华, 吴昌学

单位：贵州医科大学基础医学院，临床医学院，贵州 贵阳 550025；贵州医科大学医学分子生物学重点实验室，贵 州 贵阳 550004

关键词：苗药方四大血；类风湿性关节炎；细胞凋亡；细胞焦亡；数据挖掘；分子对接,

目的 探讨苗药验方四大血（SX）对人类风湿性关节炎（RA）成纤维样滑膜细胞（FLSs）凋亡和焦亡的影响。方法 数据库检索RA及凋亡、焦亡相关靶蛋白；韦恩软件分析获得与RA相关凋亡及焦亡蛋白；RA-凋亡-焦亡靶蛋白互作（PPI）网络构建以获取RA中凋亡和焦亡重要靶蛋白；Autodock vina软件进行分子对接验证SX主要活性成分与凋亡和焦亡相关蛋白的结合能力，并通过PyMoL软件进行可视化。人源第2代RA-FLSs MH7A细胞检测SX对MH7A细胞抑制率后分为空白对照组、雷公藤多甘片阳性对照组（TGT组，5 mg/L）及 5、10、20、40 mg/L SX 组，采用 Wound- healing 实验、Transwell 法、ELISA 法及Western blot法分别检测MH7A细胞的迁移和侵袭能力、凋亡和焦亡相关蛋白。结果 获得RA相关凋亡靶蛋白9个、焦亡靶蛋白15个、RA-凋亡-焦亡重叠靶蛋白4个，SX主要活性成分与TNF-α、Fas、Bax等靶蛋白均具有较高亲和力；与空白组相比，给药处理24、48、72 h，随着SX浓度增加，对MH7A细胞抑制率增加（P<0.05），药物作用6、12、24 h，同一时间点内MH7A细胞划痕修复率随SX浓度增加而减少（P<0.05）；药物作用24 h，20、40 mg/L SX组MH7A细胞侵袭个数减少（P<0.05）；20、40 mg/L SX组和TGT组TNF-α、IL-1β、IL-18的表达水平均下降（P<0.05）；20、40 mg/L SX组Bax/Bcl-2比值均增加（P<0.05）；5、40 mg/L SX组Caspase-1表达量均减少（P<0.05）；20、40 mg/L SX组Fas和FasL表达量均增加（P<0.05）。结论 SX可诱导MH7A细胞凋亡、抑制其焦亡，减缓炎症反应，其作用机制可能与下调TNF-α、IL-1β、IL-18细胞因子水平，上调Bax、Fas、FasL，抑制Bcl-2和Caspase-1蛋白表达有关。

来源：2021年第10期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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