南方医科大学学报

作者：刘 芬, 周志斐, 薛 洋, 朱 斌, 吴补领, 陈发明

单位：西北妇女儿童医院口腔科，陕西 西安 710000；第四军医大学口腔医院牙周病科，颌面外科，陕西 西安 710000；南方医科大学深圳医院颌面外科，广东 深圳 518000；西藏军区总医院口腔科，西藏 拉萨 850000； 南方医科大学深圳口腔医院（坪山），广东 深圳 518000

关键词：牙周膜干细胞,组织蛋白酶K,成牙骨质向分化,微小RNA,wnt信号通路,

目的 探讨牙周膜干细胞（PDLSC）成牙骨质向分化过程中mir-30a-wnt/β-catenin信号轴调控组织蛋白酶K（CTSK）表达的功能作用。方法 极限稀释法分离培养PDLSC，釉基质蛋白衍生物（EMD）诱导细胞成牙骨质向分化。在细胞分化过程中，通过microRNA芯片筛选差异表达的microRNA。首先，给予不同分组细胞EMD诱导和/或抑制microRNA表达等处理，无干预组细胞作为对照。利用qPCR和Western blot技术首先验证差异表达的microRNA是否能够调控CTSK的表达。之后，将细胞膜片复合陶瓷支架材料植入裸鼠皮下，利用免疫组织化学方法观察成牙骨质细胞标记蛋白CAP和CEMP-1的表达变化，明确受microRNA 调控的 CTSK 表达变化是否参与了 PDLSC 成牙骨质分化。在此基础上，从蛋白学水平观察wnt信号通路在microRNA调节CTSK表达过程中是否发挥了相应功效。结果 EMD诱导PDLSC成牙骨质向分化过程中，多种microRNA表达发生变化，其中miR-30a表达出现特异性上调（P<0.05）。表达上调的miR-30a进一步调节CTSK的表达（P<0.05），促进PDLSC异位形成类牙骨质样结构，高表达成牙骨质细胞标记蛋白CAP和CEMP-1。抑制wnt/β-catenin信号通路，miR-30a对CTSK的表达调控作用出现相应减弱。结论 EMD可能通过上调miR-30a的表达激活wnt/β-catenin信号通路从而经mir-30a-wnt/β-catenin信号轴调控CTSK诱导PDLSC向成牙骨质细胞方向分化。

来源：2021年第10期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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