南方医科大学学报

作者：牟斐斐, 陈 曦, 杜希恂, 焦 倩, 毕明霞, 姜 宏

单位：青岛大学国家生理学重点（培育）学科，山东 青岛 266071

关键词：帕金森病,α-突触核蛋白,干扰素调节因子1,神经免疫,

目的 研究α-突触核蛋白（α-Syn）对干扰素调节因子1（IRF-1）表达的影响及其分子机制。方法 选用α-Syn过表达的SH-SY5Y细胞以及3月龄、6月龄A53T α-Syn转基因小鼠，应用Real-time PCR和Western blot技术检测IRF-1表达的变化，免疫荧光染色和核浆蛋白分离技术观察IRF-1亚细胞定位情况。不同浓度的蛋白酶体抑制剂MG132（0、0.01、0.05、0.1、0.2、 0.5、1、2 μmol/L）以及溶酶体抑制剂氯喹（0、5、10、30、50、100、150、200 μmol/L）处理SH-SY5Y细胞24 h，检测细胞存活率。选用不引起细胞损伤的最大浓度0.2 μmol/L MG132和30 μmol/L氯喹处理SH-SY5Y细胞24 h，检测IRF-1蛋白水平的变化。观察α-Syn对MDM2蛋白水平的影响，并进一步通过泛素化实验检测IRF-1泛素化水平的变化。结果 α-Syn过表达不影响IRF-1mRNA水平，却可显著上调其蛋白水平（P<0.01），并且IRF-1在胞核表达的比例升高，发生核移位现象（P<0.001）。不同浓度的MG132和氯喹处理后细胞存活率随浓度升高而逐渐降低，不引起细胞损伤的最大浓度分别为0.2 μmol/L和30 μmol/L。0.2 μmol/LMG132处理后可加剧α-Syn引起的IRF-1蛋白水平的升高（P<0.01），而30 μmol/L氯喹处理后IRF-1蛋白表达无明显变化。α-Syn过表达导致MDM2蛋白水平降低（P<0.01），进而抑制IRF-1的泛素化修饰。结论 α-Syn通过泛素-蛋白酶体途径，抑制MDM2介导的IRF-1泛素化修饰，进而上调IRF-1蛋白表达。

来源：2021年第11期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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