南方医科大学学报

作者：廖晓珊, 郝宇婷, 伍梦婷, 刘会平, 蒋 亮, 叶子充, 廖文镇, 邓 红

单位：南方医科大学公共卫生学院营养与食品卫生学系，广东 广州 510515；时代生物（深圳）科技有限公司，广东 深圳 518000

关键词：二氢杨梅素；非酒精性脂肪性肝病；脂噬；AMPK/mTOR；增殖抑制,

目的 基于脂噬途径研究二氢杨梅素（DMY）对LO2细胞脂质蓄积的防治效果及其机制，并探索其对HepG2细胞的增殖抑制。方法 FBS诱导LO2细胞建立脂肪变性模型，研究分别设置对照组：10%FBS-DMEM正常培养；模型组：50%FBS-DMEM；阳性对照组：100 μg/mL DMY+10%FBS-DMEM；处理组（L-DMY组：50 μg/mL DMY+50%FBS-DMEM；M-DMY组：100 μg/mLDMY+50%FBS-DMEM；H-DMY组：200 μg/mL DMY+50%FBS-DMEM）及恢复对照组：先50% FBS-DMEM培养，后10%FBS-DMEM培养。油红O染色测定脂滴累积。试剂盒测定TC、TG、LDL水平和AST、ALT和LDH酶活性。AO染色观察自噬溶酶体数量，透射电镜观察自噬体数量。Western blot检测自噬蛋白LC3表达量。MDC染色观察自噬体形成情况，q-PCR测定LC3、ATG7、AMPK、mTOR、p62和Beclin1的mRNA表达水平。细胞周期阻滞实验分析HepG2细胞周期比例，流式细胞术检测HepG2细胞凋亡情况，细胞DNA断裂实验检测HepG2细胞DNA的完整情况。结果 DMY干预和预处理可抑制LO2细胞的脂质蓄积，并且降低TC、TG、LDL水平和AST、ALT和LDH酶活性，差异具有统计学意义（P<0.05）；DMY可促进LO2细胞的自噬体和自噬溶酶体的形成，并促进自噬蛋白LC3的表达；DMY可减轻高FBS诱导的LO2细胞自噬体形成抑制，并上调LC3（P< 0.01）、ATG7（P<0.01）、Beclin1（P<0.05）和AMPK（P<0.001）的mRNA水平，下调p62（P<0.001）和mTOR（P<0.001）的mRNA水 平。DMY可阻滞HepG2细胞的有丝分裂和细胞增殖（53.90% vs 14.62%; 32.31% vs 70.17%），诱导HepG2细胞的晚期凋亡（4.74% vs 57.86%）和DNA断裂。结论 DMY通过调节AMPK/mTOR介导的脂噬途径减少LO2细胞的脂质累积，通过阻滞细胞周期和促进凋亡抑制HepG2增殖，发挥体外护肝作用。

来源：2022年第4期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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