南方医科大学学报

作者：蒋 韩, 李珮婷, 柳丽丹, 黄 珊, 李 俊, 吴 唯

单位：中南大学湘雅三医院乳甲外科，湖南 长沙 410013

关键词：微小RNA；维生素D受体；继发性甲状旁腺功能亢进；甲状旁腺激素,

目的 探讨靶向维生素D受体（VDR）基因的miRNA及其对继发性甲状旁腺功能亢进甲状旁腺激素（PTH）分泌的影响。方法 用胶原酶消化法提取、分离和培养出继发性甲状旁腺功能亢进的甲状旁腺组织的原代细胞；运用生物信息学方法及全转录组测序的方法筛选得到靶向VDR的miRNA，双荧光素酶报告基因实验验证筛选出的miRNA与VDR的靶向关系；qRT-PCR及Western blotting检测过表达或抑制miRNA后的对VDR mRNA水平及蛋白水平和对PTH分泌的影响；qRT-PCR和免疫组织化学分别验证部分miRNA、VDR mRNA和蛋白水平的表达差异。结果 成功培养得到甲状旁腺原代细胞；筛选并验证了hsa-miR-149-5p、hsa-miR-221-5p、hsa-miR-222-3p、hsa-miR-29a-5p、hsa-miR-301a-5p、hsa-miR-873-5p、hsa-miR-93-3p均与VDR存在靶向关系；筛选并验证的7个miR中，过表达hsa-miR-149-5p、hsa-miR-301a-5p PTH分泌增加。hsa-miR-149-5p在继发性甲状旁腺功能亢进中高表达（P=0.046），VDR mRNA（P=0.0267）和蛋白水平表达均下降。结论 hsa-miR-149-5p、hsa-miR-301a-5p可能通过下调VDR基因的表达促进继发性甲状旁腺功能亢进患者PTH的分泌。

来源：2022年第4期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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