南方医科大学学报

作者：赵行宇, 杨 昆, 宋梓桐, 何 涵, 张 巍

单位：吉林医药学院生化教研室，吉林 吉林 132013；延边大学基础医学院生化教研室，吉林 延边 133000

关键词：胡桃醌；宫颈癌；HeLa；c-Myc；泛素化,

目的 观察c-Myc蛋白在宫颈癌HeLa细胞中的表达，探讨胡桃醌通过影响c-Myc蛋白泛素化降解进而影响HeLa细胞的增殖与凋亡。方法 培养人宫颈癌HeLa细胞，分为对照组：正常培养；10、20、50 μmol/L胡桃醌组：培养液中分别加入对应浓度的胡桃醌。以Western blot方法分析胡桃醌处理后c-Myc蛋白的表达。HeLa细胞分为对照组和20 μmol/L胡桃醌组，在培养0、2、4、8 h分别用Western blot检测c-Myc蛋白表达的变化；放线菌酮（CHX）法检测c-Myc蛋白半衰期的变化；CoIP方法检测c-Myc蛋白降解影响。HeLa细胞分为空白对照组：正常培养；胡桃醌组：20 μmol/L胡桃醌培养液培养；0.5、1.0、2.0 μmol/L MG132组：分别与0、1.0、2.0 μmol/L蛋白酶体抑制剂MG132加20 μmol/L胡桃醌培养，检测c-Myc蛋白表达的水平。将si c-Myc转染入HeLa细胞后，将细胞分siNC组：空载体组；si-NC；胡桃醌组：空载体加20 μmol/L胡桃醌处理；si-cMyc组：转染Myc RNA；si-cMyc20 μmol/L胡桃醌组：转染Myc RNA加20 μmol/L胡桃醌处理。MTT及流式细胞术检测20 μmol/L胡桃醌处理后对敲除及未敲除c-Myc基因的细胞增殖及凋亡的影响。结果 与对照组相比，不同浓度胡桃醌可下调c-Myc蛋白表达且曾时间及剂量依赖性（P<0.05；P<0.01）；胡桃醌可缩短c-Myc蛋白的半衰期，加入不同浓度的MG132后，即可明显上调c-Myc蛋白水平（P<0.05； P<0.01）。未用胡桃醌组相比，胡桃醌可明显增加c-Myc蛋白的泛素降解水平。未敲除c-Myc组相比，敲除组在胡桃醌处理后吸光度值明显增加（P<0.05）和早期凋亡率明显下降（P<0.05）。结论 胡桃醌通过影响c-Myc蛋白的泛素化降解过程，进而抑制HeLa细胞增殖并促进其凋亡的发生。

来源：2022年第7期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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