南方医科大学学报

作者：黄 平, 朱 晶, 李 华, 王艳召, 汤益民, 刘 强

单位：九江市第五人民医院内分泌科，江西 九江 332000

关键词：奥氮平；定量同位素标记技术；生物信息学；代谢障碍；中缝背核；5-羟色胺能突触通路,

目的 分析奥氮平连续处理的大鼠中缝背核蛋白的差异表达，探究奥氮平使用早期导致代谢障碍可能的中枢5-HT机制。方法 将40只SD大鼠随机分配到奥氮平组[灌胃奥氮平1.2 mg/(kg·d）]和对照组（灌胃等量0.9%氯化钠溶液），两组各分配10只雌性大鼠、10只雄性大鼠。给药1次/d，连续28 d。最后一次给药1 h后处理大鼠，并取大脑中缝背核样本。利用绝对和相对定量同位素标记技术联合液相色谱-串联质谱技术对大鼠中缝背核组织进行蛋白质组学分析，进一步对差异表达蛋白进行GO、KEGG通路、COG、蛋白互作网络分析。另将24只大鼠随机分为4组：2个奥氮平组和2个对照组（6只/组），类似方法得到大鼠中缝背核样本，根据蛋白质组学数据选择目标基因的表达进行qRT-PCR和Western blot验证。结果 筛选出奥氮平组与对照组大鼠中缝背核差异表达蛋白有72种上调、142种下调。GO注释分析显示，涉及奥氮平的差异表达蛋白参与细胞过程、生物调节、代谢过程、应激反应、多细胞生物过程以及结合、催化活性、分子功能调节、转录调节活性等分子功能。KEGG富集分析显示，涉及奥氮平的差异表达蛋白主要参与流体剪切应力与动脉粥样硬化、5-羟色胺能突触 、丁酸代谢、甲状腺激素合成 和IL-17信号通路等；PPI分析显示，涉及奥氮平的差异表达蛋白Hmgcs2、Cav1、Hsp90b1、Canx、Gnai1、MAPK9和LOC685513(Gng14）位于蛋白质互作网络的节点。qRT-PCR和Western blot结果显示，丁酸代谢和5-羟色胺(5-HT）能突触通路4个基因及其蛋白，其中丁酸代谢的关键调节基因Hmgcs2及其蛋白在药物处理组明显下调（P<0.01），5-羟色胺2受体调控的Slc6a4、Gnai1基因及其蛋白在药物处理组均出现显著高表达（P<0.05）。结论 奥氮平使用早期可能主要通过调控中缝背核组织Hmgcs2、Cav1、Hsp90b1、Canx、Gnai1、Slc6a4、MAPK9和Gng14等差异表达蛋白以及5-HT能突触通路等，参与大鼠机体代谢障碍的中枢5-HT作用机制。

来源：2022年第8期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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