南方医科大学学报

作者：时秀茹, 魏 可, 吴雨伦, 王文锐, 杨清玲, 陈昌杰

单位：蚌埠医学院癌症转化医学安徽省重点实验室，肿瘤基础研究与临床检验诊断重点实验室，生物技术教研室，生物化学与分子生物学教研室，安徽 蚌埠 233000

关键词：结直肠癌；转移；miR-372-5p；CXCL12,

目的 探讨miR-372-5p通过靶向PTEN调控PI3K/AKT/CXCL12信号通路对结直肠癌细胞迁移能力的影响及机制。 方法 qRT-RCR检测miR-372-5p在结直肠癌和癌旁组织及结直肠癌细胞和正常肠上皮细胞中的表达；生物信息学和双荧光素酶实验验证miR-372-5p与PTEN的靶向关系；Western blotting检测转染inhibitor-NC/mimics-NC（miR-372-5p抑制剂/类似物的阴性对照）、miR-inhibitor（miR-372-5p抑制剂）、miR-mimics（miR-372-5p类似物）以及共转染miR-inhibitor+si-PTEN（PTEN干扰）、miR-mimics+PI3K抑制剂对PTEN、CXCL12表达和PI3K/AKT信号通路激活水平的影响；Transwell实验、划痕实验检测以上各组、共转染miR-mimics+si-CXCL12（CXCL12干扰）以及转染mimics-NC、miR-mimics后的HCT116条件培养基对细胞迁移能力的影响。结果 结直肠癌组织中miR-372-5p较癌旁组织表达升高，相对于NCM460，HCT116较SW620中miR-372-5p表达上调更显著（P<0.01）；双荧光素酶实验证实PTEN是miR-372-5p的潜在靶基因（P<0.05）。相较于NC组，miR-mimics可降低PTEN蛋白表达水平，增加CXCL12蛋白表达水平和AKT磷酸化水平，提高HCT116迁移能力；而miR-inhibitor则导致相反的结果（P<0.05），si-PTEN可中和miR-inhibitor的作用（P<0.01）；PI3K抑制剂可降低CXCL12的蛋白表达水平，并抑制HCT116迁移能力（P<0.05），而miR-mimics可中和这一作用（P<0.01）；miR-mimics转染HCT116的条件培养基可提高NCM460的迁移能力（P<0.01），联合si-CXCL12可逆转miR-mimics对HCT116转移的促进作用（P<0.01）。结论 miR-372-5p通过靶向PTEN激活PI3K/AKT信号通路，上调CXCL12的表达，从而促进结直肠癌细胞的迁移能力。

来源：2022年第8期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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