南方医科大学学报

作者：罗海静, 潘 阳, 陈 雯, 张伟伟, 邵淑丽, 杨清竹, 李 铁

单位：齐齐哈尔大学生命科学与农林学院，黑龙江 齐齐哈尔 161006；抗性基因工程与寒地生物多样性保护黑龙江省重点实验室，黑龙江 齐齐哈尔 161006

关键词：CTPS基因；川楝素；胃癌；MKN-45细胞,

目的 探讨干扰CTPS基因对川楝素诱导的胃癌MKN-45细胞凋亡的影响。方法 通过生物信息学分析CTPS基因在人胃癌组织中的表达情况以及CTPS基因高表达的胃癌患者的总生存期。以人胃癌MKN-45细胞为实验材料，构建CTPS基因干扰载体，转染MKN-45细胞48 h后，采用qRT-PCR和Western blot检测CTPS基因mRNA和蛋白表达情况。用80 nmol/L的川楝素处理干扰CTPS基因的MKN-45细胞48 h，使用MTT实验法检测细胞存活率，激光共聚焦显微镜观察细胞形态，免疫荧光法检测γH2AX的表达。结果 生物信息学分析发现CTPS在人胃癌组织中高表达，CTPS基因高表达的胃癌患者总生存期短。向MKN-45细胞中分别转染Sh-ctrl空载体和Sh-CTPS干扰载体，qRT-PCR和Western blot检测显示，与转染Sh-ctrl空载体相比，转 染Sh-CTPS干扰载体的MKN-45细胞中CTPS mRNA和蛋白表达均降低，其中转染ShCTPS-3干扰效果最显著，分别降低了85.21%和53%（P<0.001）。检测细胞存活率及形态变化显示，与Sh-ctrl组相比，ShCTPS-3组细胞存活率降低（P<0.01），细胞皱缩，形态不规则，呈现凋亡特征，细胞凋亡率升高（P<0.05）；在此基础上用80 nmol/L的川楝素处理转染Sh-ctrl和ShCTPS-3的MKN-45细胞48 h，与Sh-ctrl+川楝素组相比，ShCTPS-3+川楝素组细胞存活率降低（P<0.001），细胞出现凋亡小体，细胞凋亡率升高（P<0.05）。结论 干扰CTPS基因促进川楝素诱导的胃癌MKN-45细胞凋亡。

来源：2022年第8期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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