南方医科大学学报

作者：吴 伟, 程 龙, 王 杰, 杨传蕾, 尚玉强

单位：华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院心脏大血管外科，湖北 武汉 430000

关键词：MiRNA-26a；结缔组织生长因子；血管钙化,

目的 探究miRNA-26a调控结缔组织生长因子对血管平滑肌细胞钙化的作用。方法 将细胞分为对照组、模型组、模型+AR234960组、AR234960+miR-26a mimic组和miR-26a mimic组。对照组细胞正常培养基培养，模型组VSMC细胞诱导钙化，模型+AR234960组的VSMC细胞诱导钙化后加入AR234960激动剂干预，AR234960+miR-26a mimic组的VSMC细胞诱导钙化后用AR234960激动剂和miR-26a mimic处理，miR-26a mimic组的VSMC细胞诱导钙化后转染miR-26a mimic。茜素红染色测定各组细胞钙化沉积；试剂盒检测各组细胞碱性磷酸酶（ALP）活性；荧光定量PCR和Western blot检测各组细胞miR-26a、OPG、OPN、BMP-2、Collagen II基因和蛋白表达情况。双荧光素酶基因验证miR-26a与CTGF的结合。结果 平滑肌A7r5细胞钙化后，miR-26a的表达随着钙化时间的增加而降低（P<0.05），而CTGF的表达随钙化时间的增加而增加（P<0.05）。茜素红染色结果显示，AR234960能够增加细胞的钙化程度，而miR-26a mimic能够减轻细胞钙化。与对照组相比，模型组ALP活性、OPN、BMP-2、Collagen II mRNA和蛋白的表达显著升高（P<0.05），OPG mRNA和蛋白的表达显著降低（P0.05），而miR-26a mimic组ALP活性、OPN、BMP-2、Collagen II mRNA和蛋白的表达显著降低（P<0.05），OPG mRNA和蛋白的表达显著升高（P<0.05）；与miR-26a mimic组相比，AR234960+miR-26amimic组ALP活性、OPN、BMP-2、Collagen II mRNA和蛋白的表达显著升高（P<0.05），OPG mRNA和蛋白的表达显著降低（P<0.05）。双荧光素酶基因检测结果显示，miR-26a-inhibitor组CTGF 3'-UTR野生型中相对荧光素酶活性较miR-26a-mimic组显著升高（P<0.05）。结论 miRNA-26a能够有效降低细胞中ALP活性及OPN、BMP-2、Collagen II的表达，同时增加钙化细胞中OPG水平，为miRNA-26a通过调控CTGF水平进而对缓解血管平滑肌细胞钙化提供了理论依据。

来源：2022年第9期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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