南方医科大学学报

作者：孙广瀚, 许 霞, 万 磊, 南淑玲, 王玉凤, 赵 黎, 程 卉, 王 坤, 刘 莹, 方妍妍, 孙 朗, 朱 俊

单位：安徽中医药大学中医学院，科研技术中心，安徽 合肥 230012；安徽中医药大学第一附属医院，安徽 合肥 230031

关键词：程氏蠲痹汤；滑膜成纤维细胞；细胞自噬；PI3K/Akt/mTOR,

目的 研究程氏蠲痹汤（JBT）通过PI3K/Akt/mTOR信号轴调控类风湿关节炎滑膜成纤维细胞（RA-FLS）自噬的影响及相关机制。方法 实验分为4组：FLS组、FLS+JBT组、FLS+RAPA组、FLS+RAPA+JBT组。CCK8检测程氏蠲痹汤抑制RA-FLS的最佳浓度和时间，透射电镜观察细胞自噬小体的变化，自噬双标腺病毒实验观察细胞内自噬体、自噬溶酶体数量，RT-qPCR和Western blot检测相关指标表达水平。结果 CCK8实验筛选结果表明JBT冻干粉浓度在0.5 mg/mL，培养12 h效果最佳。电镜结果与自噬双标腺病毒实验结果趋势相同，FLS组中自噬体少量存在，JBT加入能显著增加自噬体，自噬溶酶体较少。RT-qPCR结果显示，FLS+RAPA+JBT组较FLS组、FLS+JBT组、FLS+RAPA组相比，PI3K、Akt和mTOR的mRNA水平降低更明显（P0.05），p-PI3K、p-Akt、p-mTOR、P62受到了明显抑制（P<0.05）。FLS+RAPA+JBT组较FLS组、FLS+JBT组、FLS+RAPA组相比，Beclin-1、LC3B蛋白表达量明显上升（P<0.05）。结论 程氏蠲痹汤可抑制RA-FLS的存活率，并可提高细胞自噬水平，其机制可能与下调PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。

来源：2022年第11期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

查看南方医科大学学报杂志2022年第11期