南方医科大学学报

作者：周玉霞, 赵茴茴, 帅 领, 佘加杰, 刁瑞英, 汪丽萍

单位：南方医科大学南方医院妇产科，广东 广州 510515；深圳市第二人民医院生殖医学科，广东 深圳 518035

关键词：早发性卵巢功能不全；卵母细胞；Fkbp38；mTOR信号通路；细胞凋亡,

目的 探讨他克莫司结合蛋白38（Fkbp38）在卵泡发育中的作用及其缺失导致早发性卵巢功能不全（POI）的机制。方法 采用Cre-loxp系统构建卵母细胞特异性敲除Fkbp38转基因小鼠，并应用PCR鉴定小鼠基因型，然后在蛋白水平上验证Fkbp38在卵母细胞中的敲除效果。通过HE染色在显微镜下计数敲除小鼠与同窝对照小鼠卵巢原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡及窦卵泡数量分析卵母细胞缺失Fkbp38基因对小鼠卵泡发育的影响。通过繁殖实验及ELISA实验检测小鼠繁殖能力及血清性激素水平，明确卵母细胞敲除Fkbp38基因对卵巢功能的影响。TUNEL法检测敲除小鼠与同窝对照小鼠卵巢颗粒细胞凋亡情况。检测雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路下游靶蛋白磷酸化核糖体S6（PS6）活性验证Fkbp38基因对mTOR信号通路的影响。IF检测凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）及Bcl2-Associated X（BAX）表达明确Fkbp38基因敲除对卵母细胞发育的影响。结果 卵母细胞特异性敲除Fkbp38转基因小鼠模型构建成功。敲除小鼠较对照小鼠表现出生育力下降，性激素水平紊乱，卵巢内原始卵泡、初级卵泡和次级卵泡数均显著减少（P<0.05），引起POI样改变。卵母细胞特异性敲除Fkbp38基因后，mTOR信号通路激活，颗粒细胞凋亡增加，卵母细胞内BAX蛋白表达增强，Bcl-2蛋白表达减弱，BAX/Bcl-2蛋白比值显著升高（P<0.05）。结论 Fkbp38在卵泡发育中发挥重要作用，其缺失致POI发生的机制可能是通过激活mTOR信号通路诱导细胞凋亡而引起的。

来源：2022年第11期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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