南方医科大学学报

作者：谈秋瑜, 吴 旭, 纪 方, 吴少云, 颜 亮

单位：皖南医学院活性生物大分子安徽省重点实验室，安徽 芜湖 241002；海军军医大学附属长海医院，上海 200433；芜湖医药卫生学校，安徽 芜湖 241000

关键词：miR-125b-5p,RAB3D,骨肉瘤细胞,细胞增殖,细胞迁移,

目的 探讨 miR-125b-5p 调控 RAB3D 在骨肉瘤增殖与迁移中的作用机制。方法 通过 qRT-PCR 检测正常骨细胞hFOB1.19、骨肉瘤细胞系（MG63、HOS）中miR-125b-5p的表达水平。骨肉瘤细胞系中通过脂质体转染升高或降低miR-125b-5p的表达，通过EDU和Transwell实验检测骨肉瘤细胞增殖和迁移的变化；通过生物信息学软件预测miR-125b-5p可能调控的靶基因为RAB3D；通过Western blot检测正常骨细胞hFOB1.19、骨肉瘤细胞系（MG63、HOS）中RAB3D的表达水平；骨肉瘤细胞系中通过脂质体转染升高或降低miR-125b-5p的表达，通过Western blot及qRT-PCR实验检测骨肉瘤细胞中RAB3D mRNA及蛋白表达水平；并在骨肉瘤细胞中通过脂质体转染升高或降低RAB3D的表达，通过EDU和Transwell实验检测骨肉瘤增殖和迁移的变化；随后在骨肉瘤细胞中通过脂质体转染同时升高miR-125b-5p和RAB3D的表达量，通过EDU和Transwell实验检测骨肉瘤细胞增殖和迁移的变化。结果 qRT-PCR结果表明在骨肉瘤细胞（MG63、HOS）中miR-125b-5p的表达明显下调（P<0.05）。3种生物信息学软件预测RAB3D是miR-125b-5p可能调控的靶基因。qRT-PCR、Western blot结果显示，miR-125b-5p 表达量升高，骨肉瘤细胞（MG63、HOS）中 RAB3D 的蛋白表达量下降（P<0.05）；miR-125b-5p 表达量降低，骨肉瘤细胞（MG63、HOS）中RAB3D的蛋白表达量下降（P<0.05），而RAB3D的mRNA水平没有发生变化。细胞增殖及迁移实验结果显示，miR-125b-5p与RAB3D对细胞增殖及迁移的影响相反，而同时在骨肉瘤细胞内升高miR-125b-5p与RAB3D的表达量，RAB3D对骨肉瘤细胞增殖及迁移的影响在重新升高miR-125b-5p表达量时被阻断（P<0.05）。结论 miR-125b-5p在转录后水平通过调控RAB3D的表达抑制了骨肉瘤细胞的增殖和迁移。

来源：2023年第1期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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