南方医科大学学报

作者：黄永祺, 喻 伟, 游月华

单位：南方医科大学附属深圳市龙华人民医院口腔科，广东 深圳 518109；南方医科大学口腔医学院，广东 广州 510515

关键词：槟榔碱；口腔黏膜下纤维化；外泌体；口腔成纤维细胞；巨噬细胞,

目的 探讨槟榔碱（ARE）通过调控巨噬细胞外泌体内miR-155-5p水平诱导人口腔黏膜成纤维细胞向成纤维表型转化的作用机制。方法 以人单核细胞系（THP-1）与人口腔黏膜成纤维细胞系（HOMF）为研究对象。实验设为空白对照组、阴性对照组、ARE刺激组、ARE刺激后THP-1培养上清刺激组（CS）、ARE刺激后THP-1外泌体刺激组（EXO）、ARE刺激后THP-1无外泌体上清刺激组（NES）、miR-155-5p过表达组（miR-155-5p mimics）、ARE刺激后EXO处理对照组（NC+EXO-ARE）和miR-155-5p抑制联合ARE刺激后EXO处理（miR-155-5p inhibitor EXO-ARE）组。以流式细胞术检测THP-1细胞极化情况。Transwell细胞迁移实验检测HOMF细胞迁移能力。DCFH-DA检测细胞氧化应激水平。qRT-PCR检测细胞α-SMA、I型胶原和SOCS1的mRNA转录水平。免疫印迹实验检测细胞α-SMA、I型胶原与SOCS1蛋白表达。结果 流式检测显示，相较于对照组，ARE组THP-1细胞由M0趋向M1极化。ARE对THP-1和HOMF细胞的刺激结果显示，相较于对照组，CS组与EXO组HOMF细胞迁移能力增强；细胞内氧化应激水平上调；细胞内miR-155-5p水平升高；细胞内α-SMA、I型胶原mRNA转录增多（1.90±0.08 vs 3.17±0.08；3.19±0.05 vs 5.65±0.01，P<0.05），SOCS1的mRNA转录减少（1.08±0.06 vs 0.34±0.02，P<0.05）；α-SMA、I型胶原蛋白表达上调，SOCS1蛋白表达下调。miR-155-5p操纵实验显示，与阴性对照组相比，miR-155-5p mimics组HOMF细胞迁移能力增强，细胞内α-SMA和I型胶原蛋白表达上调；而与NC+EXO-ARE组相比，miR-155-5p inhibitor组HOMF细胞迁移能力减弱，细胞内α-SMA和I型胶原mRNA转录减少（5.84±0.08 vs 2.00±0.98；7.32±0.51 vs 2.33±0.43，P<0.05）；α-SMA、I型胶原蛋白表达下调。结论 ARE可上调THP-1胞内miR-155-5p并经外泌体途径转导和抑制HOMF胞内SOCS1蛋白表达，促进HOMF细胞的纤维化表型转化。

来源：2023年第1期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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