南方医科大学学报

作者：曾 娇, 李心竹, 殷琳莹, 陈 婷, 侯 晋

单位：南方医科大学南方医院口腔科，广东 广州 510515

关键词：牙龈卟啉单胞菌；脐静脉内皮细胞；内皮屏障；细胞间连接蛋白；牙周炎,

目的 通过体外实验探讨牙龈卟啉单胞菌（P. gingivalis）破坏内皮屏障功能的分子机制。方法 人脐静脉内皮细胞（HUVECs）体外培养形成屏障后，使用感染复数（MOI）100的P. gingivals感染细胞，对照组为未感染P. gingivals的HUVECs；通过跨膜电阻值（TEER），异硫氰酸荧光素（FITC）-右旋糖酐通透性实验和细菌易位实验来评估内皮屏障功能；并使用实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）和Western blot实验检测P. gingivals对构成内皮屏障结构的主要蛋白紧密连接蛋白1（ZO-1），occludin和VE-cadherin表达的影响。结果 HUVECs在接种培养后第5天，其跨膜电阻值趋于稳定，体外内皮屏障形成。与对照组相比，感染P. gingivals后0.5 h，内皮屏障功能即会发生改变，并且随着感染时间的延长，屏障功能障碍更加显著，主要表现为：跨膜电阻值下降、40 000 /70 000 FITC-Dextran通透性上升以及易位细菌的数量增加；MTT结果显示P. gingivals对HUVECs的增殖能力没有影响（P>0.05）；除此之外，与对照组相比，HUVECs感染P. gingivals后24和48 h后，qRT-PCR和Western blot结果显示被感染的 HUVECs 中 ZO-1，occludin 和 VE-cadherin 的 mRNA 和蛋白水平出现明显的下调表达（P<0.05）。结论 P.gingivalis可以通过下调细胞间连接蛋白ZO-1、occludin和VE-cadherin的表达破坏内皮屏障，导致内皮屏障功能障碍。

来源：2023年第2期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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