南方医科大学学报

作者：张梦莹, 李 志, 裴纬亚, 李雪琴, 杨 辉, 朱小龙, 吕 坤

单位：皖南医学院重大疾病非编码RNA转化研究安徽普通高校重点实验室，皖南医学院弋矶山医院中心实验室，风湿免疫科，安徽 芜湖 241001

关键词：外泌体；lncRNA；巨噬细胞极化；JAK2；STAT3,

目的 探究M2型巨噬细胞来源的外泌体lncRNA NR_028113.1对巨噬细胞极化的影响及机制。方法 体外分离并培养BALB/c小鼠骨髓来源的巨噬细胞（BMDMs），IL-4诱导其向M2型巨噬细胞极化后，提取并鉴定M2细胞上清液所分泌的外泌体exosome（M2-exo），qRT-PCR检测M2外泌体中lncRNA的表达。将100 μg/mL的M2-exo，对照组用等体积的PBS分别与M0巨噬细胞共孵育48 h后，qRT-PCR及Western blot检测各组细胞中Arg1、YM-1、FIZZ1、iNOS和TNF-α 的表达，流式细胞术检测CD206+细胞比例，Western blot检测各组细胞JAK2/STAT3蛋白磷酸化水平。设计、合成lncRNA smart silencer特异性抑制lncRNA NR_028113.1的表达，转染M2细胞48 h后提取各组细胞（exo+NC和exo+smart silencer）上清液分泌的外泌体再与M0型巨噬细胞共孵育，检测孵育后各组细胞中Arg1、YM-1、FIZZ1、iNOS和TNF-α 的表达以及CD206+细胞比例和JAK2/STAT3信号通路蛋白磷酸化水平。结果 lncRNA NR_028113.1在M2型巨噬细胞外泌体中高表达（P<0.05）。相比于PBS对照组，与M2-exo共培养的M0巨噬细胞中Arg1、YM-1和FIZZ1表达均显著上调（P<0.05），iNOS和TNF-α 表达显著下调（P<0.05），CD206+细胞所占比例显著增加（P<0.01），JAK2/STAT3 蛋白磷酸化水平显著增加（P<0.05）。抑制M2-exo中lncRNA NR_028113.1的表达后，共培养的M0巨噬细胞中Arg1、YM-1和FIZZ1表达显著下调（P<0.05），iNOS和TNF-α表达显著上调（P<0.05），CD206+细胞所占比例显著减少（P<0.05），JAK2/STAT3蛋白磷酸化水平显著减少（P<0.05）。结论 M2型巨噬细胞来源的外泌体lncRNA NR_028113.1可显著促进巨噬细胞向M2型极化，其机制可能与激活JAK2/STAT3信号通路相关。

来源：2023年第3期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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