南方医科大学学报

作者：李佩佩, 胡音琦, 刘 佳, 王丽娜, 吴元洁, 胡建鹏

单位：安徽中医药大学新安医学教育部重点实验室，安徽 合肥 230038；安徽中医药大学中医学院，安徽 合肥 230012

关键词：脑络欣通；脑微血管内皮细胞；氧糖剥夺/再灌注；血管新生；细胞焦亡；血管内皮生长因子,

目的 探讨脑络欣通（NLXTD）含药血清对氧糖剥夺/再灌注（OGD/R）大鼠脑微血管内皮细胞（BMECs）焦亡及血管新生的影响和可能作用机制。方法 BMECs体外培养，分别经OGD/R诱导、NLXTD含药血清处理及siRNA转染caspase-1，设置Control组：BMECs+10%空白血清；OGD/R组：BMECs+OGD/R+10%空白血清；NLXTD组：BMECs+OGD/R+10% NLXTD含药血清；siRNA-NC组：BMECs转染siRNA-NC+OGD/R+10%空白血清；si-caspase-1组：BMECs转染si-caspase-1+OGD/R+10%空白血清；si-caspase-1+NLXTD组：BMECs转染si-caspase-1+OGD/R+10%NLXTD含药血清。采用CCK-8法、Transwell小室实验、管腔形成实验分别检测细胞增殖、迁移、成管能力；试剂盒测定上清液中乳酸脱氢酶（LDH）活性；ELISA法检测培养液中炎性因子IL-1β、IL-18的含量；Western blot检测细胞焦亡相关蛋白pro-caspase-1、caspase-1、NLRP3、Gasdermin D及血管生成关键蛋白VEGF，VEGFR2的表达。结果 BMECs经OGD/R诱导后出现明显的损伤；与OGD/R组比较，10%的NLXTD含药血清能显著提高OGD/R损伤BMECs的存活率、迁移能力及成管能力（P<0.01），降低IL-1β、IL-18的含量以及LDH的释放（P<0.01）；Western blot实验结果显示，NLXTD含药血清可上调OGD/R损伤BMECs的VEGF和VEGFR2蛋白表达（P<0.01），并降低pro-caspase-1、caspase-1、NLRP3、Gasdermin D的蛋白表达（P<0.01），加入caspase-1 siRNA后，能进一步促进VEGFR2蛋白表达（P<0.01）。结论 NLXTD可以提高OGD/R损伤后的BMECs增殖、迁移、成管能力，促进血管新生，其机制可能与抑制细胞焦亡caspase-1/Gasdermin D通路，减轻BMECs损伤，上调VEGF、VEGFR2水平有关。

来源：2023年第7期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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