南方医科大学学报

作者：何艳娟, 李卓颖, 申 琳, 石丁华, 李申堂

单位：长沙市第四医院儿科，湖南 长沙 410006；中南大学湘雅三医院儿科，湖南 长沙 410013

关键词：心脏祖细胞来源的外泌体；mTOR；调节性T细胞；心肌损伤,

目的 研究心脏祖细胞来源的外泌体（CPCs-Exos）对心肌梗死（MI）小鼠调节性T细胞（Treg）分化的影响及其作用机制。方法 结扎小鼠左冠状动脉前降支制备MI动物模型。所有小鼠随机分成3组，即对照组（只开胸，不结扎）、MI组（结扎左冠状动脉前降支）和CPCs-Exos组（结扎左冠状动脉前降支后尾静脉注射CPCs-Exos）。收集小鼠血清与心脏组织，流式细胞术与全自动生化仪检测Treg细胞、CD4+IL-10+T细胞百分比及LDH、CK-MB含量，TTC染色检测小鼠心肌梗死面积。收集小鼠脾脏naive CD4+T细胞，并将细胞分成对照组、CD4+T细胞活化组（CD3+CD28）、CPCs-Exos处理活化CD4+T细胞组（CD3+CD28+CPCs-Exos）、mTOR 激活剂（CD3 + CD28 + CPCs- Exos + mTOR activator）与抑制剂组（CD3 + CD28 + CPCs- Exos + mTORinhibitor）。Western blotting法检测细胞中mTOR、p-mTOR表达水平，流式细胞术检测Treg、CD4+IL-10+T细胞百分比。结果 整体动物实验结果显示，与对照组相比，MI组小鼠心肌梗死面积显著增加，血清中CK-MB（P=0.0002）、LDH（P<0.001）显著增多，Treg、CD4+IL-10+T细胞有增加趋势。与MI组相比，CPCs-Exos组小鼠梗死面积降低，CK-MB（P=0.003）、LDH（P=0.003）含量减少，Treg 细胞（P=0.001）、CD4+IL-10+T（P=0.004）细胞百分比显著增加。离体细胞水平结果显示，与Control组相比，CD3+CD28组Treg细胞（P=0.03）、CD4+IL-10+T细胞百分比（P=0.004），mTOR（P=0.04）、p-mTOR（P=0.04）表达水平有增加趋势；与 CD3+CD28 组相比，CD3+CD28+CPCs-Exos 组 Treg 细胞（P=0.01）、CD4 +IL-10+T 细胞百分比（P=0.004），mTOR（P=0.009）、p-mTOR（P=0.009）表达水平显著增加。与CD3+CD28+CPCs-Exos组相比，CD3+CD28+CPCs-Exos+mTOR activator组Treg细胞（P=0.04）、CD4+IL-10+T细胞（P=0.01）百分比显著增加，而CD3+CD28+CPCs-Exos+mTOR inhibitor组Treg细胞（P=0.04）、CD4+IL-10+T细胞百分比（P=0.04）显著降低。结论 CPCs-Exos能够诱导Treg细胞分化，其机制与mTOR途径有关。

来源：2023年第9期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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