南方医科大学学报

作者：虞亘明, 王鑫玮, 骆金光, 苏 萧, 陶怀祥, 闻志远, 关 翰

单位：蚌埠医学院第一附属医院泌尿外科，安徽 蚌埠 233004；蚌埠医学院慢性疾病免疫学基础与临床安徽省重点实验室，安徽 蚌埠 233030

关键词：缺血再灌注损伤；SPP1；HK-2细胞；大鼠；缺氧复氧模型细胞凋亡,

目的 探究SPP1基因在肾脏缺血再灌注损伤（IRI）中的作用及机制。方法 GSE131454数据集显示了肾I/R组和Sham组基因的差异表达。在GSE131454数据库中搜索，通过相关文献我们选择了SPP1作为研究对象。12只SD大鼠随机分为缺血再灌注组（IRI组）和假手术组（Sham组），各6只，IRI组使用无损伤显微血管夹钳夹肾蒂使肾脏缺血30 min，Sham组不做处理。采集肾组织并检测两组大鼠血清肌酐、尿素氮的变化，PAS染色检测两组肾脏组织病理变化，免疫组化检测SPP1基因和α-SMA基因表达变化。免疫荧光染色检测肾脏SPP1和Caspase-3的表达。肾小管上皮HK-2细胞缺氧复氧（H/R）模型分为Control组和H/R组，Western blot检测各组SPP1、Caspase-3、Kim-1蛋白的相对表达。HK-2细胞分别转染si-NC和si-SPP1，检测各组干扰效率后分为si-NC+Control组、si-NC+H/R组、si-SPP1+H/R组，Western blot检测各组细胞中Caspase-3、Kim-1蛋白相对表达量，流式细胞术检测各组细胞凋亡率。结果 IRI组大鼠血清肌酐、尿素氮相比Sham组含量显著增加（P<0.05），并观察到严重的肾小管上皮细胞脱落及坏死。在大鼠肾脏缺血再灌注损伤后，肾脏组织中SPP1和α-SMA含量显著增加（P<0.05）。与Sham组相比，IRI组大鼠组织显示SPP1和Caspase-3的荧光强度显著升高（P<0.05）。肾小管上皮细胞缺氧复氧后SPP1、Caspase-3、Kim-1蛋白表达显著增加（P<0.05）。si-SPP1组细胞SPP1蛋白表达低于si-NC组细胞（P<0.05）。si-NC+H/R组的Caspase-3、Kim-1蛋白相对表达量和凋亡率均高于si-NC+Control组（P<0.05），si-SPP1+H/R组的Caspase-3、Kim-1蛋白相对表达量和调亡率均低于si-NC+H/R组（P<0.05）。结论 SPP1在肾脏缺血再灌注损伤中的表达上调，下调SPP1表达可抑制H/R肾小管上皮细胞调亡。

来源：2023年第11期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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