南方医科大学学报

作者：辛 辰, 王笑影, 李 响, 陈 宇, 王 雪, 宁佳曦, 杨 适, 王忠琼

单位：西南医科大学附属医院消化内科，麻醉科，四川 泸州 646000

关键词：LncRNA SOX2OT；SIRT1；自噬；胆管癌细胞；5-FU耐药,

目的 探讨LncRNA SOX2OT靶向SIRT1/自噬通路调节胆管癌细胞5-FU耐药的机制。方法 将未用5-FU处理HCCC-9810细胞和不同浓度（50、100、150、200 μg/mL）5-FU处理的HCCC-9810细胞分为对照组和模型组，qRT-PCR检测LncRNASOX2OT、SIRT1 mRNA表达水平，Western blot检测SIRT1、Beclin1、LC3和p62蛋白表达。pcDNA3.1-SOX2OT和pcDNA3.1-NC转染HCCC-9810/5-FU耐药细胞，CCK-8检测细胞耐药性，划痕实验检测细胞迁移能力，qRT-PCR检测LncRNA SOX2OT、SIRT1 mRNA表达水平，Western blot检测SIRT1、Beclin1、LC3和p62表达。在以上基础上做了Rescue 实验，将OV-SOX2OT（2 μg/孔）和si-NC（75 pmol/孔）、OV-SOX2OT（2 μg/孔）和si-SIRT1（75 pmol/孔）分别共转染HCCC-9810/5-FU耐药细胞，分组为OV-SOX2OT+si-NC组和OV-SOX2OT+si-SIRT1组，以证明LncRNA SOX2OT 通过SIRT1影响自噬，并由此影响胆管癌细胞对5-FU的耐药性。RNA Pulldown验证SOX2OT与SIRT1的靶向结合关系。结果 不同浓度的5-FU均能抑制HCCC-9810细胞增殖（P<0.05）。与对照组相比，模型组SIRT1、Beclin1（P<0.001）和p62（P<0.01）蛋白表达、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值（P<0.001）、SIRT1和LncRNA SOX2OT mRNA 水平（P<0.05）均明显增加。与 OV-NC 组相比，OV-SOX2OT 组细胞迁移能力、SIRT1、Beclin1（P<0.001）和p62（P<0.05）蛋白表达、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值（P<0.001）、SIRT1和LncRNA SOX2OT mRNA（P<0.05）水平均明显增加。沉默SIRT1表达导致LncRNA SOX2OT过表达的HCCC-9810细胞对5-FU的耐药性显著降低。与OV-SOX2OT+si-NC 组相比，OV-SOX2OT+si-SIRT1 组 SIRT1（P<0.001）、p62 和 Beclin1（P<0.01）蛋白表达、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值（P<0.01）、SIRT1 mRNA（P<0.05）水平均明显降低。RNA Pulldown 检测结果显示 SOX2OT 能够直接与 SIRT1 结合。结论 LncRNA SOX2OT通过上调SIRT1表达促进自噬来增强胆管癌HCCC-9810细胞5-FU耐药性。

来源：2024年第1期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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