南方医科大学学报

作者：孙 硕, 黄 鑫, 李国东, 张春云, 卢泽梅, 张伟伟, 李泽彦, 杨清竹

单位：齐齐哈尔大学生命科学与农林学院，黑龙江 齐齐哈尔 161006；抗性基因工程与寒地生物多样性保护黑龙江省重点实验室，黑龙江 齐齐哈尔 161006；哈尔滨医科大学附属第四医院普外科，黑龙江 哈尔滨 150001

关键词：RAS选择性致死化合物3；铁死亡；结肠癌转移相关基因1；谷胱甘肽过氧化物酶4,

目的 探讨结肠癌转移相关基因1（MACC1）对RAS选择性致死化合物3（RSL3）诱导的结直肠癌细胞铁死亡的影响及其分子机制。方法 体外培养结直肠癌细胞SW620，HCT116，LOVO及RKO细胞，Western blot实验检测细胞中MACC1表达；以SW620细胞为实验材料，MTT法检测不同浓度（0、2.5、5、10、20、40 μmol/L）铁死亡诱导剂RSL3以及不同浓度（0、5、10、20 μmol/L）铁死亡抑制剂 Fer-1 对 SW620 细胞存活率的影响，分析单独使用 10 μmol/L RLS3 以及 10 μmol/L RLS3 和10 μmol/L Fer-1联合作用对SW620细胞存活率的影响，并检测干扰MACC1后不同浓度RSL3对SW620细胞存活率的影响；实时定量RT-PCR和Western blot法检测不同浓度RSL3（0、2.5、5、10 μmol/L）对MACC1在mRNA和蛋白水平的影响，并检测干扰MACC1后GPX4在mRNA和蛋白水平的表达；流式细胞仪及激光共聚焦实验检测干扰MACC1后，SW620细胞中脂质过氧化 Lipid ROS 水平的变化。结果 4 种结直肠癌细胞中 SW620 细胞 MACC1 表达量最高；铁死亡诱导剂 RSL3 抑制SW620细胞的存活率，细胞存活率随RSL3浓度升高而降低，呈剂量依赖性；不同浓度的铁死亡抑制剂Fer-1对SW620细胞的存活率没有影响；与对照Ctrl组细胞存活率相比，单独使用RSL3细胞存活率降低了50%（P<0.01），而联合使用RSL3与Fer-1处理SW620细胞，细胞的存活率得到恢复（P>0.05）；不同浓度的RSL3作用于SW620细胞后，细胞中MACC1基因在mRNA 和蛋白水平被显著抑制（P<0.01），具有一定的药物浓度依赖性。siRNA 干扰 MACC1 基因表达后，增强 RSL3 对SW620细胞毒作用，并抑制细胞中GPX4的表达（P<0.01），增加细胞中Lipid ROS水平（P<0.05）。结论 MACC1通过调控GPX4影响RSL3诱导的结直肠癌细胞铁死亡。

来源：2024年第1期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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