南方医科大学学报

作者：颜秋霞, 曾 鹏, 黄树强, 谭翠钰, 周秀琴, 乔 静, 赵晓英, 冯 玲, 朱振杰, 张国志, 胡 鸿, 陈彩蓉

单位：广州医科大学附属第六医院/清远市人民医院生殖医学中心，泌尿外科，广东 清远 511518；广东省尿控及生殖医学创新工程技术研究中心，广东 清远 511518

关键词：X连锁RNA结合基序蛋白；M2型丙酮酸激酶；膀胱癌；PKM2；糖酵解,

目的 探讨X连锁RNA结合基序蛋白（RBMX）对膀胱癌细胞（1376细胞和UC-3细胞）的增殖、迁移、侵袭的影响以及其在糖酵解中的作用。方法 采用慢病毒表达系统和siRNA干扰技术，分别构建RBMX过表达和敲低的膀胱癌细胞模型（1376细胞和UC-3细胞）。采用RT-qPCR和Western blotting分别在mRNA水平和蛋白水平上检测细胞模型是否构建成功。通过EdU增殖实验和克隆形成实验检测过表达和敲低RBMX后细胞的生长和集落形成能力，同时通过Transwell实验分析过表达和敲低RBMX后对细胞迁移、侵袭能力的影响；随后，采用Western blotting检测过表达和敲低RBMX后糖酵解关键蛋白PKM1（M1型丙酮酸激酶）和PKM2（M2型丙酮酸激酶）的表达变化；最后，利用葡萄糖和乳酸检测试剂盒分析过表达和敲低RBMX对膀胱癌细胞糖酵解的影响。结果 RT-qPCR和Western blotting结果显示，过表达RBMX膀胱癌细胞的mRNA和蛋白表达水平显著高于阴性对照组（P<0.05），敲低RBMX膀胱癌细胞的mRNA和蛋白表达水平显著低于阴性对照组（P<0.05）。过表达RBMX明显抑制膀胱癌细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭，敲低RBMX则作用相反。Western blotting实验结果显示，过表达RBMX使PKM1表达上升，PKM2表达下降，敲低RBMX则作用相反。葡萄糖消耗及乳酸生成实验表明，过表达RBMX均能抑制膀胱癌细胞葡萄糖消耗及乳酸生成（P<0.05），敲低RBMX均能促进膀胱癌细胞葡萄糖消耗及乳酸生成（P<0.05）。结论 RBMX通过下调PKM2抑制膀胱癌的发生发展和糖酵解能力，有望成为膀胱癌诊断和治疗的潜在分子靶标。

来源：2024年第1期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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