南方医科大学学报

作者：鲁玲君, 杨小迪, 张华平, 梁媛, 石秀兰, 周鑫

单位：1.山西医科大学病理生理教研室，山西 太原 030002；2.蚌埠医科大学人体寄生虫学教研室//安徽省感染与免疫重点实验室，安徽 蚌埠 233030；3.鹤壁职业技术学院医学检验教研室，河南 鹤壁 458030；4.太原市第三人民医院内镜室，山西 太原 030012

关键词：急性肝损伤,日本血吸虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂,内质网应激,炎症,凋亡,

基金：山西省回国留学人员科研资助项目(2020-074);山西省应用基础研究计划(201901D111196);山西省科技厅基础研究计划(202303021221127);山西省回国留学人员科研资助项目(2020-175)

目的 探讨重组日本血吸虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂对LPS/D-GalN诱导的急性肝损伤小鼠的保护作用及机制。 方法 将72只雄性C57BL/6J小鼠（6~8周龄）随机分为正常对照组、LPS/D-GaIN模型组、LPS/D-GaIN+rSj-Cys治疗组和rSj-Cys对照组（n=18）。LPS/D-GaIN组和LPS/D-GaIN+rSj-Cys组小鼠均腹腔注射LPS（10 μg/kg）和D-GaIN（700 mg/kg）造模；造模后30 min，LPS/D-GaIN+rSj-Cys组及rSj-Cys对照组小鼠均腹腔注射rSj-Cys（1.25 mg/kg），正常对照组小鼠注射等体积PBS。造模6 h后，每组随机挑选8只小鼠处死，收集小鼠血清及肝组织，进行后续检测，每组剩余10只分别在3、6、12、24 h观察其生存情况，并计算生存率。检测血清丙氨酸转移酶（ALT）、天冬氨酸转移酶（AST）水平，苏木精-伊红（HE）染色观察各组小鼠肝脏组织病理形态，采用ELISA检测小鼠血清炎性因子肿瘤坏死因子（TNF-α）和白细胞介素（IL-6）表达，采用免疫组化法检测肝组织巨噬细胞表面标记物CD68表达水平，采用免疫组化和免疫印迹法检测肝组织Bax、Bcl-2蛋白水平，采用TUNEL检测肝细胞凋亡情况，采用免疫印迹法检测肝组织内质网应激相关蛋白表达水平。 结果 模型组小鼠12 h生存率为30%，rSj-Cys治疗组小鼠12 h生存率为80%。模型组小鼠24 h生存率为10%，rSj-Cys治疗组小鼠24 h生存率为60%；与正常对照组相比，LPS/D-GaIN模型组小鼠血清中AST、ALT、IL-6、TNF-α含量均显著上升（P<0.01），病理结构损伤严重，肝脏巨噬细胞标志物CD68表达明显增强（P<0.01），促凋亡蛋白Bax表达显著增加（P<0.01），抗凋亡蛋白Bcl-2表达显著降低（P<0.01），肝细胞凋亡水平显著增加，肝组织内质网应激相关信号通路GRP78、CHOP、NF-κB p-p65的蛋白表达水平显著上调（P<0.05或P<0.01）；而LPS/D-GaIN+rSj-Cys治疗组小鼠转氨酶AST、ALT和炎症因子IL-6、TNF-α水平显著下降（P<0.01），肝脏病理损伤程度减轻，肝脏巨噬细胞标志物CD68表达明显降低（P<0.01），Bax表达显著降低（P<0.01），Bcl-2表达显著增强（P<0.01），肝组织内质网应激相关信号通路GRP78、CHOP、NF-κB p-p65的蛋白表达水平下调（P<0.05或P<0.01）；rSj-Cys对照组与正常对照组相比，各指标无统计学差异（P>0.05）。 结论 rSj-Cys通过抑制内质网应激，减轻炎症和肝细胞凋亡缓解LPS/D-GalN引起的小鼠急性肝损伤。

来源：2024年第6期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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