南方医科大学学报

作者：张叶明, 张袁祥, 沈学彬, 王国栋, 朱磊

单位：1.皖南医学院药学院，安徽 芜湖 241002；2.安徽省多糖药物工程技术研究中心，安徽 芜湖 241002；3.安徽省皖南地区植物药活性物质筛选与再评价工程实验室，安徽 芜湖 241002；4.安徽省代谢性疾病药物基础研究创新中心，安徽 芜湖 241002

关键词：Rab10,miRNA-103-3p,神经可塑性,自噬,抑郁症,

基金：安徽省高等学校自然科学重点研究项目(KJ2021A0858)

目的 探讨与神经保护相关的基因Rab10在抑郁症体内外模型中发挥的功能和作用机制。 方法 选取36只大鼠作为慢性应激模型组（CUMS组），每只大鼠单笼饲养，进行6周慢性不可预测温和应激，另选取12只作为对照组。CUMS组大鼠完成6周CUMS刺激后，根据旷场实验数据和体质量分成3组（12只/组）：CUMS+生理盐水组、CUMS+AAV载体组和CUMS+AAV过表达Rab10组，CUMS+saline组大鼠侧脑室注射生理盐水；CUMS+AAV组大鼠侧脑室注射AAV空病毒载体；CUMS+AAV-oe-Rab10组大鼠侧脑室注射AAV过表达Rab10载体实现Rab10基因过表达，CUMS刺激在整个实验期间持续进行。对照组大鼠始终不进行任何刺激。利用大鼠行为学指标的变化评价大鼠抑郁状态。构建CORT诱导的PC12细胞模型，CCK-8法检测细胞活力。通过TargetScan数据库预测与Rab10相互作用的miRNA及miRNA结合位点，并结合双荧光素酶和RIP实验探究miRNA-103-3p与Rab10的相互作用。在CORT刺激的PC12细胞中过表达Rab10，或在转染miRNA-103-3p inhibitor基础上沉默Rab10，qRT-PCR法检测miRNA-103-3p和Rab10的表达水平；Western blotting检测细胞中Rab10、BDNF、CREB、p62、Beclin-1、Wnt3a、Gsk3β、磷酸化（p）-Gsk3β和β-catenin的蛋白含量。 结果 病毒过表达Rab10后明显改善CUMS大鼠行为学指标（P<0.05）。qRT-PCR和Western blotting证实Rab10基因在CUMS大鼠海马与CORT诱导的PC12细胞中表达下调（P<0.05）。生物信息学结合双荧光素酶和RIP实验证实miRNA-103-3p靶向Rab10（P<0.05）。过表达Rab10或沉默miRNA-103-3p激活了Wnt/β-catenin信号通路，上调BDNF、CREB和Beclin-1的含量，下调p62蛋白的表达（P<0.05）；下调miRNA-103-3p的基础上沉默Rab10逆转了miRNA-103-3p的作用（P<0.05）。 结论 miRNA103-3p靶向Rab10激活Wnt/β-catenin信号通路，改善神经细胞的可塑性，促进细胞自噬，从而对抗CORT诱导的PC12细胞损伤。

来源：2024年第7期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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