南方医科大学学报

作者：龙清, 杨峻, 刘安玲

单位：南方医科大学生物化学与分子生物学教研室，广东 广州 510515

关键词：Rictor,血小板,血栓形成,

基金：中国博士后科学基金(2023M731541)

目的 探究Rictor对血小板活化和血栓形成的影响。 方法 利用PF4-Cre、Rictorfl/fl转基因小鼠，构建血小板特异性Rictor敲除小鼠和野生型小鼠，分别设为敲除组和对照组（总实验小鼠n=65），用于后续实验。Western blotting检测小鼠Rictor蛋白、蛋白激酶B（AKT）、p-AKT的表达水平。血常规检测敲除和对照组小鼠血小板数目。尾静脉出血实验检测敲除和对照小鼠止血功能。构建静脉血栓模型检测Rictor敲除对血栓形成的影响。使用ADP和凝血酶刺激血小板，检测Rictor敲除对血小板聚集的影响。流式细胞术分析敲除组和对照组血小板在静息态和活化态整合素αIIbβ3与CD62P的表达水平。检测血浆中PF4水平。vWF免疫组化标记巨核细胞。用APC-CD41抗体孵育敲除和对照小鼠的巨核细胞，流式细胞术检测细胞倍体。扫描电镜检测敲除和对照组血小板在胶原表面的伸展变化。 结果 与对照小鼠相比，血小板Rictor特异性敲除小鼠AKT磷酸化降低（P<0.001），血小板生成减少（P<0.05），血栓形成受到抑制（P<0.05），血小板对ADP和凝血酶刺激的活化水平降低（P<0.01），P-选择素蛋白表达水平（P<0.05）、整合素αIIbβ3活化程度（P<0.01）受到抑制，血小板伸展受到抑制（P<0.01），PF4的血浆含量降低（P<0.05），骨髓中巨核细胞数量减少（P<0.01），倍体降低（P<0.05），前血小板平均面积减少（P<0.01）。 结论 血小板特异性敲除Rictor抑制血小板生成和活化，进而减少血栓形成。抑制mTORC2活性可能是一种潜在的抗血栓靶标。

来源：2024年第8期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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