南方医科大学学报

作者：钟娜, 王会杰, 赵文英, 孙珍贵, 耿彪

单位：1.皖南医学院第一附属医院，肿瘤内科，安徽 芜湖 241000；2.皖南医学院第一附属医院，呼吸与危重症医学科，安徽 芜湖 241000

关键词：RNF7,非小细胞肺癌,NF-κB通路,MDSCs,抗PD-1治疗,

基金：安徽省高校重大自然科研项目(2023AH040266);安徽省自然科学基金(2008085QH351);安徽省教育厅重点项目(KJ2021A0838)

目的 探讨RNF7在非小细胞肺癌（NSCLC）中调控髓源性抑制细胞（MDSCs）的作用机制。 方法 采用TIMER2.0数据库和免疫组织化学染色分析（IHC）分析RNF7在NSCLC中表达水平。Kaplan-Meier曲线分析RNF7对肺癌患者预后的影响。通过TIMER2.0数据库和多重免疫荧光分析评估RNF7的表达与肿瘤免疫细胞浸润水平之间的相关性。通过C57BL/6小鼠建立皮下移植瘤模型，将RNF7过表达对照组（lenti-GFP，n=10）和RNF7过表达组（lenti-RNF7，n=10），RNF7敲低对照组（Ctrl，n=12）和RNF7敲低组（shRNF7，n=12）的CMT-167细胞分别种植到小鼠皮下，对于RNF7敲低对照组和RNF7敲低组的小鼠7 d后给予anti-PD-1治疗或同型IgG治疗，30 d后获取肿瘤组织，观察皮下瘤体积。通过IHC检测肿瘤组织中S100A8+A9、Gr-1的表达水平，流式细胞术检测肿瘤组织中MDSCs的浸润程度。基因集富集分析（GSEA）RNF7在非小细胞肺癌中可能的调控通路。Western blotting和荧光素酶检测RNF7对NF-κB信号通路的影响。ELISA和RT-qPCR观察趋化因子（C-X-C基序）配体1的表达情况。 结果 TCGA数据库分析显示RNF7在NSCLC中的表达水平显著上调，生存分析显示，肺癌患者中RNF7的表达水平越高，患者的预后越差（P<0.001），TIMER2.0数据库显示RNF7的表达与MDSCs的浸润程度呈正相关（P<0.001）。GESA分析提示，在NSCLC中，RNF7高表达富集于NF-κB信号通路。Western blotting实验显示，RNF7低表达能够抑制NF-κB信号通路激活。通过ELISA和RT-qPCR结果显示，敲除RNF7可显著降低CXCL1的转录和翻译（P<0.01）。小鼠皮下移植瘤实验显示，与对照组相比，过表达RNF7可增加MDSCs的浸润程度，敲除RNF7减少MDSCs的浸润程度（P<0.001）。并减轻MDSCs对效应细胞的免疫抑制功能，从而增强了抗PD-1的功效。 结论 RNF7通过激活NF-κB信号通路，促进CXCL1的表达，从而使MDSCs趋化募集，使肿瘤产生抗PD-1耐药。

来源：2024年第9期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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