南方医科大学学报

作者：杜越, 张秀森, 周克旭, 金星, 原翔, 高社干

单位：1.河南省微生态与食管癌防治重点实验室//河南省肿瘤表观遗传重点实验室，河南 洛阳 471003；2.河南科技大学第一附属医院//河南科技大学临床医学院，河南 洛阳 471003

关键词：食管鳞状细胞癌,牙龈卟啉单胞菌,RgpB,Cx43,化疗耐药,

基金：国家自然科学基金(82073029);河南省科技攻关项目(242102310146)

目的 探讨牙龈卟啉单胞菌（Pg）的毒力因子RgpB在食管鳞癌化疗耐药中的作用机制。 方法 采用免疫沉淀-质谱联用技术筛选与Pg的毒力因子RgpB互作的自噬调节因子；运用免疫共沉淀实验探索RgpB和自噬调节因子TBC1D5之间的相互作用；采用蛋白免疫印迹法测定Pg感染对食管癌细胞膜受体分子Cx43表达的影响；使用细胞免疫荧光检测Lamp1、Cx43与TBC1D5的关系；利用自噬双荧光观察Pg感染对自噬小体与溶酶体融合的影响；使用平板克隆及CCK-8法检测Pg感染及Cx43抑制剂在使用化疗药后对食管癌细胞系增殖作用的影响。 结果 免疫沉淀-质谱联用技术筛选出与RgpB互作的自噬调节因子TBC1D5；免疫共沉淀结果显示，Pg分泌的毒力因子 RgpB可与自噬调节因子TBC1D5直接结合并相互作用；蛋白免疫印迹法结果显示，感染Pg后食管癌细胞膜Cx43表达量高于未感染组（P<0.05）；细胞免疫荧光结果显示，在感染Pg后，Cx43在细胞膜表面的表达量增加（P<0.05）；stubRFP-sensGFP-LC3自噬双荧光结果显示，在Pg感染时，自噬体与溶酶体融合受到阻断；平板克隆及CCK-8法结果显示，使用化疗药后，Cx43抑制剂能够逆转Pg感染对食管癌细胞系的促进作用。 结论 Pg入侵食管癌，其毒力因子RgpB阻碍自噬小体与溶酶体融合，从而使膜受体分子Cx43免受溶酶体降解，导致食管癌化疗耐药。

来源：2024年第9期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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