南方医科大学学报

作者：马华根, 黄燕, 杨盈欣, 刘海琴, 唐元瑜, 丛伟红

单位：1.中国中医科学院西苑医院，北京 100091；2.北京中医药大学中医学院，北京 100029；3.海军军医大学上海长征医院，上海 200003；4.福建中医药大学中医学院，福建 福州 350122

关键词：血管干细胞,主动脉,切段外膜贴壁培养法,原代培养,免疫表型,分化潜能,血管重构,

基金：国家自然科学基金(81973594)

目的 采用“切段外膜贴壁培养法”体外培养扩增出原代大鼠主动脉血管干细胞，为开展血管重构及相关疾病研究提供实用的工具细胞。 方法 无菌分离2~3周龄Sprague-Dawley大鼠胸腹主动脉，切成长约2.0 mm的血管节段，均匀种瓶，经外膜贴壁固化后进行原代培养，待细胞生长融合度达80%~90%时传代。镜下观察细胞形态及其生长特性，采用流式细胞仪分析目的细胞表面标志物CD分子表达情况，成脂、成骨诱导分化实验检测其多向分化潜能。 结果 接种3 d后，少量梭形、星形或多角形的细胞从血管节段周围爬出；5~6 d后形成岛屿状细胞集落，细胞增殖迅速，呈放射状向外扩大，并出现细胞克隆现象；7~8 d后细胞融合成片，呈涡旋状分布；传至第3代后，细胞匀质性较高，表现为典型的“成纤维样”排列生长。流式细胞仪分析细胞主要表达CD44、CD73、CD90，阳性率分别为80.3%、62.2%、46.8%；低表达CD34、CD45、CD11b/c，阳性率分别为1.1%、0.2%、0.2%。体外诱导分化实验表明目的细胞具有成脂、成骨分化潜能。 结论 “切段外膜贴壁培养法”可成功分离培养出具有间充质干细胞特性的大鼠主动脉血管干细胞。

来源：2024年第10期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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