南方医科大学学报

作者：付长龙, 林艳铭, 兰书洁, 陈悦, 李超, 陆诗雨, 林晴

单位：1.福建中医药大学中西医结合学院（中西医结合研究院），福建 福州 350122；2.福建省中西医结合老年性疾病重点实验室，福建 福州 350122；3.福建中医药大学中医学院，福建 福州 350122

关键词：透骨消痛胶囊,Nav1.7,软骨退变,膝骨关节炎,

基金：国家自然科学基金(82474532);福建中医药大学校管课题(X2023024);福建中医药大学高层次人才科研启动资金项目（X2019011-人才）;陈可冀中西医结合发展基金项目(CKJ2021018)

目的 从Nav1.7调控软骨细胞外基质稳态角度，研究透骨消痛胶囊对减轻膝骨关节炎（KOA）软骨细胞退变的作用机制。 方法 选择40只2月龄C57BL/6小鼠，通过随机数字表法将其分为空白组（n=10）和造模组（n=30）。造模组小鼠通过Hulth法手术建立KOA模型后，随机分为模型组（生理盐水灌胃）、透骨消痛胶囊组（368 mg/kg剂量灌胃）、阳性药物组（10 mg/kg双氯芬酸钠灌胃），10只/组；空白组为生理盐水灌胃，干预6次/周，共4周。干预后5%异氟醚麻醉处死，获得膝关节软骨组织。形态学染色观察软骨组织结构变化，实时荧光定量PCR检测Nav1.7 mRNA水平，Western blotting分析Nav1.7、MMP-3、ADAMTS-5、COX-2蛋白表达变化。荧光原位杂交检测软骨细胞中Nav1.7的表达量。此外，利用慢病毒载体敲减Nav1.7（sh-Nav1.7）转染软骨细胞，实时荧光定量PCR分析转染后sh-Nav1.7在软骨细胞中mRNA水平变化。Western blotting分析在sh-Nav1.7条件下，透骨消痛胶囊对KOA软骨细胞MMP-3、MMP-13、ADAMTS-4、ADAMTS-5、COX-2蛋白的调控。 结果 形态学结果显示，和模型组对比，透骨消痛胶囊组和阳性药物组软骨层结构更完整，关节结构破坏程度减轻。透骨消痛胶囊组和阳性药物组的Nav1.7蛋白与mRNA水平降低（P<0.05），MMP-3、ADAMTS-5、COX-2蛋白表达减少（P<0.05）。荧光原位杂交结果显示，透骨消痛胶囊能降低IL-1β诱导的Nav1.7的荧光强度。在Nav1.7敲减实验中，与IL-1β组相比，IL-1β+sh-Nav1.7组中Nav1.7水平下降（P<0.05）；与IL-1β+TGXTC组相比，IL-1β+sh-Nav1.7+TGXTC组中Nav1.7水平下降（P<0.05）。Western blotting结果表明，IL-1β组软骨细胞中升高的MMP-3、MMP-13、ADAMTS-4、ADAMTS-5、COX-2蛋白被透骨消痛胶囊干预后显著抑制（P<0.05），但在Nav1.7敲低后，透骨消痛胶囊对这些蛋白的调控作用减弱（P<0.05）。 结论 透骨消痛胶囊通过调控Nav1.7减轻KOA软骨细胞外基质代谢紊乱，从而发挥减轻软骨细胞退变的作用。

来源：2024年第11期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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