南方医科大学学报

作者：石情, 冉苏叶, 宋铃榆, 杨红, 王文娟, 刘晗琳, 刘琦

单位：贵州医科大学附属医院消化内科，贵州 贵阳 550000

关键词：非酒精性脂肪肝,NLRP6,AMPK,脂肪酸氧化,

基金：贵州省教育厅青年科技人才成长项目(黔教技[2024]107);贵州省科技计划（黔科合基础-ZK[2024]）;贵州省科协青年科技人才托举工程项目(GASTYESS202433);贵州省科技厅基础研究计划项目（黔科合基础-ZK[2022]）;贵州医科大学附属医院马歇尔联合实验室项目(N-2021-13);贵州医科大学国家自然科学基金培育项目(21NSFCP16);贵医附院国家自然科学基金培育项目Gyfynsfc [2020]21

目的 研究核苷酸结合寡聚化结构域样受体含pyrin结构域蛋白6（NLRP6）在肝脏脂代谢及非酒精性脂肪性肝病 （NAFLD）发展过程中的作用及机制。 方法 构建高脂饲料喂养（HFD）模型小鼠，分为对照组（正常喂养）、模型组［高脂（脂质含量60%饮食）喂养］，6只/组，持续喂养16周。构建蛋氨酸­胆碱缺乏饮食（MCD）小鼠模型，分为对照组［喂养蛋氨酸-胆碱充足 （MCS）饮食］和模型组（喂养蛋氨酸-MCD饮食），6只/组，持续喂养8周。使用HE染色及油红O染色鉴定模型是否造模成功，免疫组化染色（IHC）检测两种小鼠模型肝脏中NLRP6的表达。在正常人肝细胞系LO2细胞中使用腺病毒过表达 NLRP6，或 siRNA 敲低 NLRP6，使用棕榈酸（PA）构建NAFLD细胞模型，NLRP6过表达处理分组Ad-Vec组、Ad-NLRP6组、Ad-Vec+PA组、Ad-NLRP6+PA组；NLRP6敲低处理分组阴性对照（NC）组、sh-NLRP6组、NC+PA组、sh-NLRP6+PA组。采用甘油三酯 （TG） 试剂盒、油红染色、qPCR、Western blotting、ATP 试剂盒和 β-羟基丁酸试剂盒检测NLRP6对脂质代谢的影响及NLRP6对AMPK通路及使用AMPK抑制剂Compound C后AMPK通路的变化。 结果 在HFD、MCD饮食诱导NAFLD小鼠模型小鼠肝脏中NLRP6表达降低（P<0.001）。在细胞实验中LO2细胞过表达NLRP6后，与Ad-Vec+PA组相比，Ad-NLRP6+PA组细胞内TG含量降低（P<0.0001），且脂质沉积减少；敲低NLRP6，与NC+PA组相比，sh-NLRP6+PA组细胞内TG含量增加（P<0.05），并且脂质沉积加重；与Ad-Vec+PA组相比，Ad-NLRP6+PA组PGC1A、CPT1A mRNA及蛋白表达水平增加（P<0.01）。脂质氧化分解代谢产物ATP、β-羟丁酸含量升高（P<0.05）。与Ad-Vec+PA组相比，Ad-NLRP6+PA组肝细胞中AMPK通路磷酸化水平升高（P<0.05）；使用AMPK抑制剂后，Ad-NLRP6引起的脂质氧化分解作用被抑制关。 结论 NLRP6通过AMPK/CPT1A/PGC1A促进肝细胞脂肪氧化分解，改善脂质沉积。

来源：2025年第1期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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