南方医科大学学报

作者：多文娟, 王怡祥, 王家兴, 许鑫龙, 李林献, 杨栋臣, 申启利, 杨立春, 刘晓静, 金启旺, 褚亮, 杨小迪

单位：1.蚌埠医科大学基础医学院，安徽 蚌埠 233030；2.安徽省感染与免疫重点实验室，安徽 蚌埠 233030；3.蚌埠医科大学第二附属医院普外科，安徽 蚌埠 233030；4.南京紫金医院，江苏 南京 210000

关键词：重组日本血吸虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂,脂多糖,盲肠结扎穿刺,脓毒症,免疫调节因子,

基金：国家级大学生创新训练项目(202210367068);蚌埠医科大学自然科学重点(2023byzd028);蚌埠医科大学研究生科研创新计划项目(Byycx22011);省级大学生创新训练项目(S202310367045)

目的 探讨重组日本血吸虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂（rSj-Cystatin）对“二次打击”脓毒症小鼠的干预作用。 方法 64只C57BL/6雄性小鼠随机分为假手术组（A组）、蛋白组（B组）、“二次打击”造模组（C组）、蛋白干预组（D组），16只/组。A组和B组小鼠首先腹腔注射PBS（100 μL/只），24 h后开腹探查盲肠，但不进行盲肠结扎和穿刺（CLP），术后30 min，分别腹腔注射PBS（100 μL/只）或含25 μg rSj-Cystatin 蛋白的PBS（100 μL/只）；C组和D组小鼠首先腹腔注射含LPS（5 mg/kg）的PBS（100 μL/只），24 h后行 CLP手术，术后30 min，分别腹腔注射PBS（100 μL/只）或含25 μg rSj-Cystatin 蛋白的PBS（100 μL/只）。每组随机抽取6只，造模12 h后取小鼠血清、脾、肝、肺和肾组织。肝、肺和肾组织HE染色观察其病理损伤并进行评分；酶联免疫吸附实验（ELISA）检验血清和肝、肺、肾组织匀浆中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10（IL-10）和转化生长因子-β（TGF-β）水平以及组织中巨噬细胞极化标志物iNOS和Arg-1水平；流式细胞术检测脾脏CD3+CD4+CD25+Foxp3+T的比例变化；剩余小鼠造模后记录72 h生存率并观察小鼠状态。 结果 与A、B组（100%）相比，C组（0%）72 h生存率降低，经rSj-Cystatin蛋白治疗后，D组生存率较C组增高（20%）。与A、B两组相比，C组肝、肺、肾组织切片病理损伤加重，血清和组织匀浆中TNF-α、IL-6水平明显升高（P<0.05）； 经蛋白治疗后，病理损伤程度减轻，血清和组织匀浆中TNF-α、IL-6水平降低（P<0.05），调节因子IL-10、TGF-β水平明显升高（P<0.05），同时CD3+CD4+CD25+Foxp3+T比例升高（P<0.05）；与A、B两组相比，C组各器官组织中iNOS水平均升高，而Arg-1水平呈差异性，仅在肾中呈下降趋势（P<0.01）；与C组相比，D组iNOS水平下降（P<0.05），Arg-1水平升高（P<0.001）。 结论 rSj-Cystatin可通过调节炎症微环境进而对 “二次打击”脓毒症起到明显的治疗作用。

来源：2025年第1期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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