南方医科大学学报

作者：代振佳, 高群伟, 应梦娇, 王澳, 洪娟, 王春景, 郭俣, 刘长青, 刘高峰

单位：1.蚌埠医科大学，生命科学学院，安徽 蚌埠 233000；2.蚌埠医科大学，安徽省神经再生技术与医用新材料工程研究中心，安徽 蚌埠 233000；3.蚌埠医科大学，检验医学院，安徽 蚌埠 233000

关键词：化学重编程,小分子诱导,成纤维细胞,上皮样细胞,

基金：国家自然科学基金(82371382);安徽省高校自然科学基金项目(2024AH040193);蚌埠医科大学大学生创新训练计划项目(bydc2024038)

目的 利用小分子化合物组合将人胎盘成纤维细胞（HPFs）重编程为化学诱导上皮样细胞（ciEP-Ls）。 方法 常氧条件下培养HPFs细胞，通过免疫荧光、PCR和染色体核型分析鉴定HPFs。生理性低氧条件下（37 ℃，5%O2），HPFs在含有小分子化合物C6TSEDRVAJZ（CHIR99021、616452、TTNPB、SAG、EPZ5676、DZNep、Ruxolitinib、VTP50469、Afuresertib、JNK-IN-8、EZM0414）的培养基中进行诱导，诱导期间每日定时观察细胞形态。通过免疫荧光法、Western blotting和PCR技术检测上皮细胞标志物的表达水平。对诱导细胞进行染色体核型分析，并计算诱导效率。 结果 HPFs免疫荧光结果显示，表达成纤维表面标记物CD34和Vimentin，不表达上皮表面标志物；PCR结果显示，成纤维特异性基因S100A4、COL1A1高表达，且具有人正常二倍体核型。在低氧条件下诱导1 d后，部分HPFs细胞形态发生改变，由多突的纺锤形变成圆形或多边形，具有ciEP-Ls形态特征。诱导处理完成第4天，免疫荧光和Western blotting结果显示，诱导细胞能够高表达上皮细胞特征性标志物E-Cadherin和Lin28A（P<0.05）。PCR结果表明，细胞显著表达上皮标志物Smad3，GLi3，PAX8，WT1，KRT19和KRT18，而成纤维细胞表面标记物表达均下调，且诱导细胞具有人正常二倍体核型，HPFs重编程效率为（64.53±2.80）%~（68.10±3.60）%。 结论 小分子组合C6TSEDRVAJZ在低氧条件下成功将HPFs诱导为ciEP-Ls，且具有较高的诱导效率。

来源：2025年第2期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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